申请/专利权人:中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日:2022-10-18
公开(公告)日:2024-04-19
公开(公告)号:CN117904013A
主分类号:C12N1/21
分类号:C12N1/21;C12N15/70;C12N15/31;C12Q1/10;C12N9/88;C12N9/00;C12Q1/527;C12Q1/25;C12R1/19
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.05.07#实质审查的生效;2024.04.19#公开
摘要:本发明提供一种甾体诱导抗性基因表达的大肠杆菌质粒及其应用。所述质粒以pLysS为基础进行改造,整合了teiR、hsdR、repA三种转录因子和受它们调控表达的tcR共计四个基因的操纵子序列,构建成单一的质粒pDERNHT。该质粒转化大肠杆菌可用于检测甾体类物质的浓度。将该质粒与甾体代谢酶表达质粒共转入大肠杆菌,可以实现对甾体代谢酶的活性筛选。本发明通过将甾体代谢酶活性与四环素抗性耦联,进而与菌体繁殖速度耦联,从而实现对甾体浓度的检测;进一步的,可以利用菌体之间的生存竞争,实现对甾体代谢酶活性的大规模自动化筛选,具有高通量、低仪器依赖的优点。
主权项:1.一种甾体生物传感器,其特征在于,含有teiR、hsdR、repA三种转录因子和受它们调控表达的tcR共计四个基因的操纵子序列的宿主菌,其所述四个操纵子序列构建在单一质粒上,或分别构建在不同质粒上,或者一个或多个操纵子序列整合到宿主菌的基因组中,优选地,所述宿主菌为大肠杆菌。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 中国科学院天津工业生物技术研究所 一种利用甾体化合物诱导抗性基因表达的大肠杆菌质粒及其应用
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