申请/专利权人：厦门大学

申请日：2021-11-09

公开（公告）日：2024-04-19

公开（公告）号：CN114717299B

主分类号：C12Q1/686

分类号：C12Q1/686

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.19#授权;2022.07.26#实质审查的生效;2022.07.08#公开

摘要：本发明公开了一种糖基化外泌体PD‑L1的检测方法，包括如下步骤：1分离外泌体；2连接第一偶合物与第一DNA，所述的第一偶合物能够与外泌体的糖基结合；3加入第一偶合物与第一DNA的偶联物；4加入PD‑L1适配体；5稀释反应溶液；6加入连接臂DNA；7在连接臂的作用下DNA连接酶将第一DNA与PD‑L1适配体连接；8对与连接臂互补的第一DNA与PD‑L1适配体连接部分进行扩增，检测扩增信号。本发明方法特异性检测糖基化的外泌体PD‑L1，无需分离释放糖蛋白，检测灵敏度高，检测限为1.09pgmL，适用于多种生物体系。

主权项：1.一种糖基化外泌体PD-L1的检测方法，用于非疾病诊断目的，包括如下步骤：1）分离外泌体；2）连接第一偶合物与第一DNA，所述的第一偶合物能够与外泌体的糖基结合；所述第一DNA序列如SEQIDNO:1所示；3）在分离的外泌体中加入第一偶合物与第一DNA的偶联产物，得到溶液一；4）在溶液一中加入PD-L1适配体，得到溶液二；所述PD-L1适配体如SEQIDNO:4所示；5）溶液二中加入连接臂DNA，所述的连接臂DNA的第一段能够与第一DNA的至少一部分结合，连接臂DNA的第二段能够与PD-L1适配体的至少一部分结合，三者形成第一DNA-连接臂DNA-PD-L1适配体产物；在DNA连接酶的作用下，连接臂DNA连接第一DNA与PD-L1适配体；所述连接臂DNA如SEQIDNO:5所示；6）对与连接臂互补的第一DNA与PD-L1适配体连接部分进行扩增，检测扩增信号；扩增引物为SEQIDNO:6和SEQIDNO:7所示序列；步骤2）中，所述的第一偶合物为凝集素；步骤2）中，所述的连接，其方式包括偶联。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 厦门大学 一种糖基化外泌体PD-L1的检测方法

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