申请/专利权人:青岛农业大学
申请日:2023-02-07
公开(公告)日:2024-04-19
公开(公告)号:CN116144632B
主分类号:C12N9/26
分类号:C12N9/26;C07K1/14;C07K1/16;C12N15/56;C12N15/70;C12P19/02;C12P19/14;C12R1/19
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.04.19#授权;2023.06.09#实质审查的生效;2023.05.23#公开
摘要:本发明提供了一种茶树中性碱性转化酶CsINV2蛋白及其制备方法和应用,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明所述制备方法,包括:采用BamHⅠ对pMAL‑C2X质粒进行单酶切反应,将得到的载体片段与CsINV2基因连接,得到重组质粒pMAL‑C2X‑CsINV2,转化到表达菌株中,获得重组菌株;将所述重组菌株经培养后得到的菌液破碎、离心,得到上清粗蛋白,用过柱法纯化所述上清粗蛋白,得到茶树中性碱性转化酶CsINV2蛋白。采用本发明的方法能够克服中性碱性转化酶因蛋白不稳定和很难纯化的问题,为工业化生产葡萄糖和果糖提供强有力的技术支撑。
主权项:1.一种茶树中性碱性转化酶CsINV2蛋白的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:采用BamHⅠ对pMAL-C2X质粒进行单酶切反应,将得到的载体片段与CsINV2基因连接,得到重组质粒pMAL-C2X-CsINV2,转化到表达菌株中,获得重组菌株;将所述重组菌株培养后得到的菌液破碎、离心,得到上清粗蛋白,用过柱法纯化所述上清粗蛋白,得到茶树中性碱性转化酶CsINV2蛋白;所述CsINV2基因的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 青岛农业大学 一种茶树中性/碱性转化酶CsINV2蛋白及其制备方法和应用
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