申请/专利权人：中国科学院大学深圳医院(光明)

申请日：2023-11-18

公开（公告）日：2024-04-26

公开（公告）号：CN117925812A

主分类号：C12Q1/6883

分类号：C12Q1/6883;G01N33/68

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.05.14#实质审查的生效;2024.04.26#公开

摘要：本发明公开了miRNA‑296‑5p通过ACE2信号通路对内皮祖细胞增殖的调控作用方法，涉及内皮祖细胞增殖调控技术领域，包括如下步骤：S1：临床实验；S11：确定研究对象；S12：病例选择标准；S13：观察指标与方法：①qRT‑PCR法：通过Trizol法提取各组样本的总RNA；②酶联免疫吸附试验ELISA：用ELISA测定各组患者血清Ang‑1‑7的表达水平，反应中止后，采用酶标仪测量450nm处的OD值。本发明探究miR‑296‑5pACE2轴在高血压并发急性脑卒中患者中的表达相关性以及评价miR‑296‑5p成为判断高血压并发脑卒中的生物标志物的特异性和敏感性。

主权项：1.miRNA-296-5p通过ACE2信号通路对内皮祖细胞增殖的调控作用方法，其特征在于：包括如下步骤：S1：临床实验；S11：确定研究对象；S12：病例选择标准；S13：观察指标与方法：①qRT-PCR法：通过Trizol法提取各组样本的总RNA；②酶联免疫吸附试验ELISA：用ELISA测定各组患者血清Ang-1-7的表达水平，反应中止后，采用酶标仪测量450nm处的OD值；③根据患者的临床病理资料，Spearman相关性分析miR-296-5p与临床病理参数年龄，性别，吸烟饮酒史等的相关性；④绘制受试者工作特征曲线ROC曲线和曲线下面积AUC分析患者中miR-296-5p的表达情况，评价miR-296-5p作为高血压性脑卒中诊断标志物的特异性和敏感性。S2：细胞实验；S21：EPCs细胞分离、培养；S22：EPCs细胞鉴定：①记录不同情况下细胞的形态、生长、增殖情况；②用流式细胞仪分析处理后的EPCs；S23：载体构建及细胞转染；S24：指标检测：1靶向性验证：①双荧光素酶报告基因实验；②原位荧光杂交FISH；2miR-296-5p在高血压性脑卒中患者EPCs中的表达情况：①qRT-PCR法：检测步骤同上；②Westernblot法：检测脑组织和血清中EPCs内ACE2、Mas的蛋白表达水平；③ELISA法：检测步骤同上；3miR-296-5p调节EPCs增殖的机制研究：①CCK8实验；②细胞划痕实验；③Transwell小室实验；④AnnexinV-FITCPI双染法结合流式细胞术；⑤qRT-PCR法：检测步骤同上；⑥免疫荧光法检测；⑦ELISA法：检测步骤同上。S3：载体构建及细胞转染；S31：确定实验动物；S32：高血压动物模型构建；S33：tMCAO模型构建；S34：EPCs注射及实验分组；S35：行为学实验：①神经功能评估；②平衡木行走试验；S36：分子生物学实验：①TTC染色检测；②TTC染色检测；③免疫组织化学；④qRT-PCR法：检测步骤同上；⑤Westernblot法：检测步骤同上；⑥ELISA法：检测步骤同上。S4：统计学分析。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国科学院大学深圳医院(光明) miRNA-296-5p通过ACE2信号通路对内皮祖细胞增殖的调控作用方法

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。

阅读全文 双屏查看 官方信息 专利公告 收藏专利 下载PDF 下载WORD