申请/专利权人：康化(上海)新药研发有限公司

申请日：2024-01-17

公开（公告）日：2024-04-26

公开（公告）号：CN117929571A

主分类号：G01N30/02

分类号：G01N30/02;G01N30/06;G01N30/74;G01N30/86

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.05.14#实质审查的生效;2024.04.26#公开

摘要：本发明公开了一种轮环藤宁四乙酸单N‑羟基琥珀酰亚胺酯高效液相色谱测定方法，主要解决现在缺少轮环藤宁四乙酸单N‑羟基琥珀酰亚胺酯液相色谱分析方法的技术问题。本发明测定方法包括以下步骤：一，准备测量的试剂，二，流动相溶液配制；三，样品溶液配制；四，进行高效液相色谱测定，色谱仪为安捷伦1260色谱仪，采用DAD紫外检测器，安捷伦氨基色谱柱，流动相为磷酸盐缓冲液（A）和色谱纯乙腈（B），通本发明为轮环藤宁四乙酸单N‑羟基琥珀酰亚胺酯检测领域提供了可靠便捷的检测手段。

主权项：1.一种轮环藤宁四乙酸单N-羟基琥珀酰亚胺酯高效液相色谱测定方法,其特征是：包括以下步骤：步骤一，准备测量的试剂，测量的试剂包括色谱纯异丙醇，色谱纯乙腈，超纯水，分析纯磷酸氢二钾和分析纯磷酸二氢钾；步骤二，流动相溶液配置，流动相A为磷酸盐缓冲液，配制如下：将磷酸氢二钾和磷酸二氢钾置于容量瓶，加超纯水,超声溶解，用超纯水定容,超声脱气，过滤后备用；流动相B为色谱纯乙腈，过滤后备用；步骤三，样品溶液的配制，称取轮环藤宁四乙酸单N-羟基琥珀酰亚胺酯试样置于棕色容量瓶中，加入异丙醇，室温条件下采用超声波溶解，用异丙醇定容，最后试样用聚丙烯有机滤膜过滤后进行高效液相色谱分析，当样品中轮环藤宁四乙酸单N-羟基琥珀酰亚胺酯吸收超过0.5AU时，需稀释样品，使样品的吸收在0.2~0.5AU范围；步骤四，高效液相色谱测定的过程为：色谱条件为样品室温度为25℃，自动进样器进样体积为1~10µL，色谱柱为：反相C18色谱柱，柱温：30℃，流速：0.45mLmin，流动相为流动相A：磷酸盐缓冲液和流动相B：色谱纯乙腈，采用梯度洗脱程序，0～20min，VB为0到15%；通过对流动相酸度值的控制，轮环藤宁四乙酸单N-羟基琥珀酰亚胺酯在色谱柱中保留时间不大于10min。

全文数据：

权利要求：

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