申请/专利权人：东北林业大学

申请日：2024-03-06

公开（公告）日：2024-04-26

公开（公告）号：CN117925391A

主分类号：C12M1/34

分类号：C12M1/34;C12M1/00;C12M1/24;C12M1/38;C12M1/36;C12Q1/686

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.05.14#实质审查的生效;2024.04.26#公开

摘要：一种基于三内核双乳液滴可控融合的单细胞PCR装置及运行方法，涉及核酸检测技术领域。本发明分别将样本细胞的细胞稀释液及细胞裂解液和细胞稀释液作为内相溶液生成三个内核大小不一的双乳液滴，操控交流电场按照内核大小顺序先后触发细胞稀释液内核与细胞裂解液内核和细胞稀释液的内核融合，使双乳液滴逐步具备PCR反应条件，并进一步通过高温变性、低温退火和适温延伸三个阶段的加热循环，在双乳液滴独特的核—壳结构中实现液滴数字PCR精准化检测。本发明可获得一种基于三内核双乳液滴可控融合的单细胞PCR装置及运行方法。

主权项：1.一种基于三内核双乳液滴可控融合的单细胞PCR装置，其特征在于所述的单细胞PCR装置包括玻璃毛细管芯片和PCR反应载体操控PDMS芯片，所述的玻璃毛细管芯片由内相入射管a2、内相入射管b3、内相入射管c4、中间相入射管6、方形玻璃管7和收集管8组成；所述的PCR反应载体操控PDMS芯片由加热ITO玻璃9、电控融合ITO玻璃17和PDMS通道19组成；所述的内相入射管a2、内相入射管b3、内相入射管c4、中间相入射管6和收集管8的一端均为锥形结构；所述的中间相入射管6的锥形结构端从方形玻璃管7的左端伸入，所述的收集管8的锥形结构端从方形玻璃管7的右端伸入；所述的内相入射管a2、内相入射管b3和内相入射管c4的锥形结构端从中间相入射管6的左端伸入，且中间相入射管6和收集管8的锥形结构端与方形玻璃管7的中心线重合；所述的内相入射管a2的左端作为细胞稀释液的入口，所述的内相入射管b3的左端作为细胞裂解液的入口，所述的内相入射管c4的左端作为PCR反应液的入口；所述的中间相入射管6的外壁与方形玻璃管7的内壁之间形成的环状入口作为外相溶液的入口；所述的内相入射管a2、内相入射管b3和内相入射管c4的外壁与中间相入射管6的内壁之间形成的入口作为中间相溶液的入口，所述的收集管8的锥形结构端作为三内核双乳液滴的入口，收集管8的另一端作为三内核双乳液滴的出口；所述的加热ITO玻璃9的上表面依次加工有微型加热电极a10、微型加热电极b11和微型加热电极c12，且微型加热电极a10、微型加热电极b11和微型加热电极c12的两端均连接有直流电源；所述的微型加热电极a10、微型加热电极b11和微型加热电极c12的上表面设置有电控融合ITO玻璃17，所述的电控融合ITO玻璃17的上表面依次加工有等间距排列的高频电控融合电极a13、低频电控融合电极a14、高频电控融合电极b15和低频电控融合电极b16，且均处于PDMS通道19入口处的直管路下面，高频电控融合电极a13和高频电控融合电极b15的两端均连接有高频率交流电源，低频电控融合电极a14和低频电控融合电极b16的两端均连接有低频率交流电源；所述的收集管8的出口与PDMS通道19的入口连通，所述的PDMS通道19的出口作为最终融合内核207的出口。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 东北林业大学 一种基于三内核双乳液滴可控融合的单细胞PCR装置及运行方法

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