申请/专利权人：大连理工大学

申请日：2024-01-26

公开（公告）日：2024-04-26

公开（公告）号：CN117925716A

主分类号：C12N15/85

分类号：C12N15/85;G01N21/64;G01N33/543;C12N15/12;C12N5/10

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.05.14#实质审查的生效;2024.04.26#公开

摘要：本发明公开了一种高通量筛选斑马鱼血清素转运体抑制剂的方法，属于环境毒理、生态毒理技术领域。本发明构建了表达斑马鱼zSERT的细胞模型，提供一种基于荧光分光光度法的筛选斑马鱼血清素转运体抑制剂的方法，用于高通量检测zSERT与抗抑郁药污染物的结合亲和力强弱，从而发现环境中对鱼类有毒性的抗抑郁药污染物。与传统的同位素标记方法相比，本发明的方法具有高灵敏度、低成本、高特异性，对设备与测试环境要求不高，可避免放射性污染等优点。

主权项：1.一种高通量筛选斑马鱼血清素转运体抑制剂的方法，包括以下步骤：1将斑马鱼血清素转运体zSERT基因插入到载体中，构建zSERT质粒；2将100-200μLOpti-MEM与100ngzSERT质粒混合均匀，将100-200μLOpti-MEM与2-3μLLipofectamine2000试剂混合均匀，然后与zSERT质粒混合物混合均匀，将所得的混合物在室温下培养10-30分钟，然后加入到培养有细胞的孔板中，瞬时转染入细胞中；3将步骤2得到的转染质粒的细胞接种到孔板中，培养1-2小时，加入待测溶液，培养5-20分钟后，加入APP溶液，在37℃、5％CO2下培养0.5-2小时；4去除培养基，清洗后，加入HBSS，通过酶标仪在激发波长485nm，发射波长525nm条件下，检测细胞内的APP荧光强度。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 大连理工大学 一种高通量筛选斑马鱼血清素转运体抑制剂的方法

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