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【发明公布】一种测定血浆中贝母辛、西贝母碱、贝母素甲、贝母素乙浓度的方法_南京中医药大学_202410023778.8 

申请/专利权人:南京中医药大学

申请日:2024-01-08

公开(公告)日:2024-04-26

公开(公告)号:CN117929599A

主分类号:G01N30/06

分类号:G01N30/06;G01N30/88

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.05.14#实质审查的生效;2024.04.26#公开

摘要:本发明设计一种测定血浆中太白贝母所含贝母辛,西贝母碱,贝母素甲,贝母素乙浓度的方法。本发明方法快速、准确、灵敏度高、操作简便,为贝母辛,西贝母碱,贝母素甲,贝母素乙的血药浓度测定提供依据,具有新药开发的前景。本方法贝母辛,西贝母碱,贝母素甲,贝母素乙的血浆标准曲线范围为:0.99‑495.88ng.mL‑1,0.45‑222.46ng.mL‑1,0.51‑254.31ng.mL‑1,0.47‑232.26ng.mL‑1,日内和日间精密度的RSD均小于12.36%。

主权项:1.一种测定血浆中贝母辛,西贝母碱,贝母素甲,贝母素乙浓度的方法,其特征在于,血浆样品经预处理后经液质联用系统检测其浓度,具体方法包括如下步骤:1血浆样品预处理:取血浆样品,加入内标黎芦碱甲醇溶液,加入甲醇进行蛋白沉淀,离心后取上清液;2将步骤1预处理后的血浆样品进行液相色谱分离,使用液质联用系统检测贝母辛,西贝母碱,贝母素甲,贝母素乙浓度,色谱条件:色谱柱:AgilentExtend-C18色谱柱,反相色谱柱,流动相A为0.1%甲酸,B为乙腈,进行梯度洗脱,洗脱程序为:0-3min,乙腈的体积分数从5%线性增加至38%,3-5min,乙腈的体积分数从38%线性增加至40%,5-6min,乙腈的体积分数从40%线性增加至95%,6-7min,乙腈的体积分数保持在100%,7-8min,乙腈的体积分数从95%线性减少至5%,8-9min,乙腈的体积分数保持在5%;流速:0.3mlmin;柱温40℃;进样量5μL;质谱条件:采用ESI+模式进行检测,检测方式采用多反应监测模式MRM,参数如下:离子源温度550℃;离子化电压4500V;雾化气55psi;辅助加热气55psi;气帘气35psi;氮气作为喷雾辅助气体,各成分贝母辛、西贝母碱、贝母素甲、贝母素乙的质谱参数Q1Q3mz分别为:429.4114.3、431.4413.4、433.4425.4、431.4413.4;去簇电压DP分别为40.87V、65.79V、48.70V、55.98V;碰撞电压CE分别为:36.05V、43.05V、41.19V、42.11V;3计算:采用内标法,以贝母辛,西贝母碱,贝母素甲,贝母素乙和内标黎芦碱的峰面积比值代入标准曲线方程计算各成分的浓度,所述血浆为大鼠血浆。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 南京中医药大学 一种测定血浆中贝母辛、西贝母碱、贝母素甲、贝母素乙浓度的方法

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