申请/专利权人:唐宁医药科技(济南)有限公司
申请日:2024-01-16
公开(公告)日:2024-04-30
公开(公告)号:CN117946197A
主分类号:C07J17/00
分类号:C07J17/00
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.05.17#实质审查的生效;2024.04.30#公开
摘要:本发明涉及生物医药领域,特别涉及一种西洋参茎叶中皂苷成分的提取方法及应用。该方法以西洋参茎叶为原料,采用与桂圆肉炮制,索式提取器去色素、提取总皂苷的方法,得到纯度95%以上的总皂苷,再用三相高速逆流色谱分离纯化,得到原人参二醇型皂苷:西洋参皂苷Rb1、西洋参皂苷Rb2、西洋参皂苷Rb3的比例为5:2:15;C‑17侧链异构型皂苷:西洋参皂苷L1、西洋参皂苷L2、西洋参皂苷L3的比例为3:5:8,本发明中L型西洋参总皂苷为本发明首次在西洋参茎叶制备,此外本发明所得到的皂苷类成分在治疗肝癌中有重要的作用。
主权项:1.一种西洋参茎叶中皂苷成分的提取方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)以采收的西洋参茎叶为原料,西洋参茎叶与桂圆肉,蒸制5-8h,剔除桂圆肉,西洋参茎叶烘干,即得西洋参茎叶蒸制品;(2)去色素:取西洋参茎叶蒸制品,粉碎过100-300目筛,用若干个300目袋分包,置索氏提取器中,加体积比0.5:99.5的氨水-乙酸乙酯混合溶液500ml,加热回流1.5小时,弃去氨水-乙酸乙酯混合溶液,残渣挥尽氨水-乙酸乙酯,得去色素后的西洋参茎叶;(3)提取总皂苷:将步骤(2)得到的去色素后的西洋参茎叶重新置索氏提取器中,加体积比0.5:99.5的氨水-甲醇混合溶液1000ml,加热回流提取12h,回收氨水-甲醇混合溶液至干,残渣加正丁醇饱和的水300ml使溶解,转移至分液漏斗中,用水饱和的正丁醇振摇提取至少4次,合并正丁醇液;(4)去除杂质:将步骤(3)中得到的正丁醇液用1%盐酸溶液洗涤,弃去盐酸溶液,再用正丁醇饱和的水洗至中性,弃去水洗液,回收正丁醇至干,即得纯度为95%以上的西洋参茎叶总皂苷提取物;(5)三相高速逆流色谱分离纯化:以分散有O-羧甲基壳聚糖功能化多壁碳纳米管的水相为固定相,流动相A为水饱和5:1四氯化碳-丙酮,流动相B为水饱和10:1正丁醇-甲醇,设置梯度流速为0min,95%A;60min,65%A;120min,35%A;高速逆流色谱仪柱体积为500ml,上样量50mg,转速900rpm,流速2mLmin,检测器为蒸发光检测器;收集30min-60min洗脱液,蒸干溶剂,得原人参二醇型皂苷:西洋参皂苷Rb1、西洋参皂苷Rb2、西洋参皂苷Rb3;收集90min-120min洗脱液,蒸干溶剂,得C-17侧链异构型皂苷:西洋参皂苷L1、西洋参皂苷L2、西洋参皂苷L3。
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