申请/专利权人：烟台市供销社茶业有限公司;烟台供销服务中心

申请日：2024-03-01

公开（公告）日：2024-04-30

公开（公告）号：CN117801967B

主分类号：C12N1/14

分类号：C12N1/14;A23F3/16;C12R1/645

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.30#授权;2024.04.19#实质审查的生效;2024.04.02#公开

摘要：本发明涉及微生物发酵工程领域，尤其涉及一种培养冠突散囊菌的方法及应用，将桑叶茯茶作为冠突散囊菌的提取茶基，将普鲁兰多糖作为冠突散囊菌培养基成分之一，在传统培养基基础上，替换碳源葡萄糖，在优化菌种之前即可加快冠突散囊菌的培养速度，同时提高后续冠突散囊菌的纯度，降低了生产成本，培养冠突散囊菌的时间缩短至2‑3.5天。同时制备的桑叶茯茶成品中的冠突散囊菌远高于有关标准对冠状散囊菌的理化指标要求。

主权项：1.一种培养冠突散囊菌的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1、将桑叶茯茶研磨成茶粉，将茶粉和普鲁兰多糖溶于无菌水中，获得混合溶液，过滤后倒入温热后的马铃薯琼脂培养基中，进行若干组倒置培养试验；其中，所述桑叶茯茶中冠突散囊菌为29×104CFUg；步骤2、对步骤1中获得的菌落进行纯化，得到单菌落，对单菌落进行鉴定，鉴定合格的为冠突散囊菌；步骤1中所述茶粉的粒径为80目，所述茶粉和普鲁兰多糖的质量比为10：0.02，所述混合溶液中普鲁兰多糖的浓度为50mgmL；步骤1中使用0.2μm过滤膜进行过滤；步骤1中温热的温度为18℃；步骤1中所述马铃薯琼脂培养基为固体培养基，其制备方法为：（1）制备马铃薯粉末：将马铃薯洗净、去皮、挖去芽眼，切块，隔水蒸30min，结束后将马铃薯块取出，研磨成马铃薯泥浆，将马铃薯泥浆压薄，所述马铃薯泥浆的厚度为1cm，在35℃的温度下烘干3h，获得马铃薯粉末；（2）制备马铃薯琼脂培养基：取马铃薯粉末和无菌水按照15：50的质量比混合，获得混合液，将所述混合液水热煮沸30min后过滤获得营养液，向所述营养液中加入琼脂，获得培养基溶液，将培养基溶液放入灭菌后的培养皿中，获得所述马铃薯琼脂培养基；其中，所述琼脂占所述培养基溶液的质量百分数为2%；步骤1中所述马铃薯琼脂培养基的接种量为0.5%，即过滤后的混合溶液与温热的马铃薯琼脂培养基的体积比为3：100；步骤1中倒置培养的条件为25℃，培养的pH值为7，培养12h；步骤2中的纯化步骤为将步骤1的菌落划线接种至凝固后的所述马铃薯琼脂培养基上，在25℃环境中，培养36h；步骤2的鉴定为真菌种属鉴定。

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