申请/专利权人:西北农林科技大学
申请日:2023-11-12
公开(公告)日:2024-05-17
公开(公告)号:CN118048398A
主分类号:C12N15/85
分类号:C12N15/85;C12N15/65;C12N5/10;C12N15/12;C12N15/48
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.06.04#实质审查的生效;2024.05.17#公开
摘要:本发明公开了一种能够标记全能性胚胎干细胞的MERVL‑H2B‑tdTomato报告细胞系的构建方法,所述细胞模型利用CRISPR‑Cas9基因组编辑技术在小鼠胚胎干细胞R1中将含有MERVL‑H2B‑tdTomato‑Hygro的片段定点整合在基因组Rosa26位点,通过潮霉素筛选后获得稳定插入MERVL‑H2B‑tdTomato的细胞系。本发明的报告细胞系中的H2B核定位信号,可以避免细胞质非特异性荧光的干扰,使tdTomato表达更加集中,方便实时观察和研究MERVL阳性细胞的表达比例。该报告细胞系可以用于全能性调控相关基因和小分子的筛选,及全能性胚胎干细胞维持调控的分子机制。
主权项:1.一种MERVL-H2B-tdTomato报告细胞系的构建方法,其特征在于,为获得表达核定位的荧光蛋白报告细胞,将MERVL-H2B-tdTomato定点敲入到Rosa26基因组位置。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 西北农林科技大学 一种MERVL-H2B-tdTomato报告细胞系的构建方法
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