申请/专利权人:深圳华大生命科学研究院
申请日:2018-11-20
公开(公告)日:2024-05-17
公开(公告)号:CN112888699B
主分类号:C07H19/24
分类号:C07H19/24;C07H1/04
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.05.17#授权;2021.06.18#实质审查的生效;2021.06.01#公开
摘要: 提出了测序用核苷酸的制备方法,即制备式I所示化合物的方法,1将式II所示化合物与第一磷酸化试剂进行第一亲核取代反应,所述第一磷酸化试剂为三氯氧磷;2将第一亲核取代反应产物与第二磷酸化试剂进行第二亲核取代反应,以便获得式I所示化合物,所述第二磷酸化试剂不同于所述第一磷酸化试剂;其中,R1为H或OH,Base为腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶或尿嘧啶,R2为H或荧光标记物。
主权项:1.一种制备式I所示化合物的方法,其特征在于,1将式II所示化合物与第一磷酸化试剂进行第一亲核取代反应,所述第一磷酸化试剂为三氯氧磷,其中,所述式II所示化合物预先与质子海绵进行第一混合处理;2将第一亲核取代反应产物与第二磷酸化试剂进行第二亲核取代反应,以便获得式I所示化合物,所述第二磷酸化试剂不同于所述第一磷酸化试剂,所述第二磷酸化试剂为Bu3N2PPi; 其中,R1为H,Base为腺嘌呤,R2为H;所述式II所示化合物与质子海绵的摩尔比为1:1.5、1:2或1:2.5;所述式II所示化合物与三氯氧磷的摩尔比为1:5;所述式II所示化合物与Bu3N2PPi的摩尔比为1:2.5;所述第一混合处理是在POOMe3溶剂中、在无水无氧的条件下进行的;所述Bu3N2PPi预先在乙腈中进行溶解处理,所述溶解处理是在无水无氧条件下进行5-10分钟;在所述溶解处理后、第二亲核取代反应前,进一步包括溶解处理后的Bu3N2PPi与三乙胺进行第二混合处理。
全文数据:
权利要求:
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