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申请/专利权人：长春生物制品研究所有限责任公司
申请日：2023-08-25
公开（公告）日：2024-05-14
公开（公告）号：CN118021946A
主分类号：A61K39/29
分类号：A61K39/29;C12N5/071;C12N7/00;C12N7/02;A61P1/16;A61P31/14
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.05.31#实质审查的生效;2024.05.14#公开
摘要：本发明公开了一种利用生物反应器制备甲型肝炎灭活疫苗的方法，属于生物疫苗制备技术领域。该方法包括以下步骤：1、人二倍体细胞的传代及扩增；2、接种甲型肝炎病毒；3、病毒收获物制备；4、甲肝病毒的提取与纯化。本发明成功建立一种利用生物反应器低血清培养二倍体细胞用于制备甲肝病毒的生产工艺，并确定细胞内甲肝病毒提取及层析纯化工艺；利用生物反应器培养细胞，相对于用细胞工厂培养细胞的优势在于：片状载体属于3D结构，表面积更大，细胞可以进行高密度培养，减少批间差异，提高收获率，保证疫苗质量的稳定性与均一性。
主权项：1.一种利用生物反应器制备甲型肝炎灭活疫苗的方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：1将冻存的人二倍体细胞复苏，在低血清培养液中培养并进行传代扩增，接种至片状载体篮氏生物反应器中继续培养；2在篮氏生物反应器中将细胞培养至平台期，更换为无血清维持液，接入MOI为0.01-0.1的甲型肝炎病毒，完成病毒接种；3完成病毒接种后培养至病毒增殖高峰期，排出细胞维持液，应用Hank’s液清洗细胞，之后向篮氏生物反应器内注入胰蛋白酶消化液进行消化，充分消化后加入含有血清的终止液同时辅以搅拌桨正、反转搅拌，得到病毒收获液，离心后取沉淀即为病毒收获物；4将得到的病毒收获物经去氧胆酸钠裂解液裂解后加入PEG6000沉淀，沉淀后加入三氯甲烷抽提，将抽提液层析纯化后灭活，最后经膜包进行超滤浓缩去除灭活剂，得到甲型肝炎灭活疫苗。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 长春生物制品研究所有限责任公司 一种利用生物反应器制备甲型肝炎灭活疫苗的方法
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