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申请/专利权人：香港大学深圳医院(深圳市滨海医院)
申请日：2021-05-07
公开（公告）日：2024-05-14
公开（公告）号：CN114085811B
主分类号：C12N5/0775
分类号：C12N5/0775;C12N5/077
优先权：
专利状态码：有效-授权
法律状态：2024.05.14#授权;2022.03.15#实质审查的生效;2022.02.25#公开
摘要：一种利用肌层细胞外泌体体外扩增子宫内膜间充质干细胞的方法，包括将分离分选后的子宫内膜间充质干细胞接种到预先用纤连蛋白处理过的培养皿上，贴壁生长16～30小时；经PBS洗涤后，加入子宫肌层细胞来源的外泌体进行共培养，便可得到大量扩增的子宫内膜间充质干细胞。本发明提供的方法采用干细胞生态位子宫肌层细胞来源的外泌体富集Notch信号通路配体Jagged1，且具有良好的生物相容性及生物活性，能够最大限度的模拟干细胞在人体内的真实生长情况，与子宫内膜间充质干细胞体外共培养后有效促进干细胞增殖的同时能够维持其干性。因此，本发明提供的方法改良了干细胞体外培养，对提高子宫内膜间充质干细胞的临床应用具有重要意义。
主权项：1.一种利用肌层细胞外泌体体外扩增子宫内膜间充质干细胞的方法，其特征在于，包括将通过磁珠分离得到的CD140b+CD146+子宫内膜间充质干细胞接种到预先用纤连蛋白处理过的培养皿上，贴壁生长16～30小时；经PBS洗涤后，加入子宫肌层细胞来源的外泌体进行共培养，所述共培养的时间为5～10天，便可得到大量扩增的子宫内膜间充质干细胞；所述子宫肌层细胞来源的外泌体的获取方法包括如下步骤：1子宫肌层细胞的分离：将子宫肌层组织切成小块，用含有III型胶原酶和I型脱氧核糖核酸酶的PBS溶液进行重悬，然后消化过滤；将过滤得到的单细胞悬液接种到的培养皿中，用含有10％胎牛血清的DMEMFF12生长培养基进行培养；2子宫肌层细胞外泌体的分离：对细胞密度达到70-85％的子宫肌层细胞进行消化，对消化得到的子宫肌层细胞悬浮液采用完全培养基进行扩增培养；在第四天将完全培养基换成不含胎牛血清的DMEMF12培养基培养48小时，收集外泌体。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 香港大学深圳医院(深圳市滨海医院) 一种利用肌层细胞外泌体体外扩增子宫内膜间充质干细胞的方法
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