申请/专利权人：赛锐思生物技术(吉林)有限公司

申请日：2024-03-06

公开（公告）日：2024-05-14

公开（公告）号：CN117844988B

主分类号：C12Q1/70

分类号：C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.05.14#授权;2024.04.26#实质审查的生效;2024.04.09#公开

摘要：本发明提供了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒RT‑qPCR检测引物、试剂盒及其应用，属于病毒检测技术领域。本发明的猪繁殖与呼吸综合征病毒RT‑qPCR检测引物如SEQIDNO.1、SEQIDNO.2所示，探针如SEQIDNO.3所示。本发明的猪繁殖与呼吸综合征病毒RT‑qPCR检测试剂盒的反应体系是根据本发明扩增目的基因片段及特定引物探针序列设计的，具有更高的检测灵敏度，30min内完成RT‑qPCR扩增，检测灵敏度高达0.312copiesμL。本发明的试剂盒具有定量线性范围好、检测的抗干扰能力强、检测精密度高、稳定性强的优点。

主权项：1.一种猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-qPCR检测试剂盒，其特征在于，所述RT-qPCR检测试剂盒包括包括正向引物PRRSV-F1、反向引物PRRSV-R1、荧光探针PRRSV-P1以及qPCR酶预混液；所述正向引物PRRSV-F1的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示；反向引物PRRSV-R1的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示；荧光探针PRRSV-P1的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示；所述qPCR酶预混液包括PCRbuffer和酶混合液；PCRbuffer和酶混合液的体积比为1.5～3:1；在所述RT-qPCR检测试剂盒中，检测引物、荧光探针和所述qPCR酶预混液以全预混的形式存在；所述PCRBuffer包括以下浓度的组分：Tris0.2～0.3M，KCl45～55mM，MgCl223～25mM，dNTP0.2～0.5mM，dUTP0.2～0.3mM，牛凝血酶0.5～5μgmL，四氢嘧啶0.4～0.6M，单链结合蛋白1～8ngμL，二硫苏糖醇6～10mM，硫代乙酰胺0.5～2.5mM，蔗糖0.25～1％，DMSO2～3％；蔗糖、DMSO的百分含量为体积百分含量；所述酶混合液包括以下浓度的组分：RNA酶抑制剂2.3～2.5UμL；尿嘧啶糖基化酶0.4～0.6UμL，高效逆转录酶15～17UμL；快速TaqDNA聚合酶0.1～0.2UμL。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 赛锐思生物技术(吉林)有限公司 一种猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-qPCR检测引物、试剂盒及其应用

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