申请/专利权人：山西省农业科学院作物遗传研究所

申请日：2007-05-15

公开（公告）日：2011-05-18

公开（公告）号：CN101092624B

主分类号：C12N15/29(2006.01)I

分类号：C12N15/29(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I

优先权：

专利状态码：失效-未缴年费专利权终止

法律状态：2017.06.30#未缴年费专利权终止;2011.05.18#授权;2008.02.20#实质审查的生效;2007.12.26#公开

摘要：本发明涉及一种基因的构建方法，具体为一种提高马铃薯对PVX病毒和PVY病毒双抗性的基因的构建方法，解决现有提高马铃薯对两种病毒的双抗性的方法存在的多种问题，包括以下步骤，  将PVX外壳蛋白基因全序列cp上的保守基因片段与具有相同酶切位点的PVY复制酶基因全序列NIb上的保守基因片段连接起来构成人工融合基因cn；将人工融合基因cn以正向和反向分别连接到内含子两侧，构建成人工融合基因的反向重复序列，人工融合基因cn的反向重复序列两端分别连有启动子和终止子。该融合基因的反向重复序列导入马铃薯后，其对两种病毒的双抗株率高，且抗性能达到高抗，甚至免疫水平，较易在生产上应用。

主权项：一种提高马铃薯对X病毒和Y病毒的双抗性基因的构建方法，其特征是包括以下步骤，1分别从感染PVX病毒和PVY病毒的植物体内经提取总RNA、RT‑PCR扩增以及基因克隆工序得到PVX外壳蛋白基因全序列cp和PVY复制酶基因全序列NIb；2利用PCR扩增分别得到PVX外壳蛋白基因全序列cp和PVY复制酶基因全序列NIb上的一段保守基因片段，保守基因片段位于PVX外壳蛋白基因全序列cp的第126‑642个核苷酸处和PVY复制酶基因全序列NIb的第587‑1132个核苷酸处；3酶切PCR扩增得到的PVX外壳蛋白基因全序列cp的保守基因片段，与具有相同酶切位点的PVY复制酶基因全序列NIb上的一段保守基因片段连接起来以构成人工融合基因cn；4将人工融合基因cn以正向和反向分别连接到pdk内含子的两侧，构建成一个人工融合基因的反向重复序列，该序列即为提高马铃薯对X病毒和Y病毒的双抗性基因RNAiCN；5人工融合基因cn的反向重复序列两端分别连有启动子和终止子。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 山西省农业科学院作物遗传研究所 一种提高马铃薯对PVX病毒和PVY病毒双抗性的基因的构建方法

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。

阅读全文 双屏查看 官方信息 专利公告 收藏专利 下载PDF 下载WORD