申请/专利权人：杭州蜂之语蜂业股份有限公司

申请日：2013-05-27

公开（公告）日：2014-11-05

公开（公告）号：CN103267823B

主分类号：G01N30/88(2006.01)I

分类号：G01N30/88(2006.01)I

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2014.11.05#授权;2013.09.25#实质审查的生效;2013.08.28#公开

摘要：本发明涉及一种高效液相色谱法测定蜂胶中Artepillin C含量的方法。目前还没有一种简单、快速、准确的该类方法。本发明包括样品处理工序、标准曲线制作工序和样液测定工序；样品处理工序中，称取蜂胶样品0.5g，加入20ml甲醇，甲醇定容至50ml，吸取上清液1-2mL，用80%的磷酸甲醇液定容至50ml，得到样液；标准曲线制作工序中，以y表示液相色谱图中Artepillin C所对应的峰面积A，x表示Artepillin C的浓度C mgmL，求得标准溶液的回归方程为y=ax+b；样液测定工序中，采用液相色谱仪对样液进行测定。本发明简单，快速，准确，检测成本低，节约人力，检测时间短，效率高。

主权项：一种高效液相色谱法测定蜂胶中Artepillin C含量的方法，其特征在于：该方法包括样品处理工序、标准曲线制作工序和样液测定工序；所述样品处理工序中，称取粉碎均匀的蜂胶样品0.5g，加入20ml甲醇，超声溶解20min，冷却后，再用甲醇定容至50ml，混匀，静置10min，吸取上清液1‑2mL，用体积百分含量为80%的磷酸甲醇液定容至50ml，混匀，过滤，去掉5mL初滤液，取1mL续滤液过0.22μm滤膜，得到样液；所述体积百分含量为80%的磷酸甲醇液的配制方法为：80mL甲醇中加20mL体积百分比为0.4%磷酸混合而成；所述标准曲线制作工序包括标准溶液制备步骤、标准溶液测定步骤和标准曲线制作步骤，所述标准溶液制备步骤中，称取Artepillin C标准品5mg，用甲醇定容至10mL，配成浓度为0.5mgmL的贮备标准溶液；取贮备标准溶液200μL，加入1800μL体积百分含量为80%的磷酸甲醇液稀释，混匀后得到浓度为0.05mgmL的中间标准液；取中间标准液10μL、20μL、40μL、100μL、200μL、400μL和1000μL，分别用990μL、980μL、960μL、900μL、800μL、600μL和0μL体积百分含量为80%的磷酸甲醇液混匀，从而配制成Artepillin C浓度分别为0.0005mgmL的一号标准溶液、0.001mgmL的二号标准溶液、0.002mgmL的三号标准溶液、0.005mgmL的四号标准溶液、0.01mgmL的五号标准溶液、0.02mgmL的六号标准溶液和0.05mgmL的七号标准溶液；所述标准溶液测定步骤中，采用液相色谱仪来进行测定，液相色谱仪的柱温为30℃，检测波长为320nm，进样量为5μL，流动相中的A为甲醇、B为体积百分含量0.4%的磷酸；采用液相色谱仪分别对一号标准溶液、二号标准溶液、三号标准溶液、四号标准溶液、五号标准溶液、六号标准溶液和七号标准溶液进行测定，分别得到对应的液相色谱图；所述标准曲线制作步骤中，以y表示液相色谱图中Artepillin C所对应的峰面积A，x表示Artepillin C的浓度C mgmL，求得标准溶液的回归方程为y=ax+b，其中，a和b均为实数；所述样液测定工序中，采用液相色谱仪对样液进行测定，采用的色谱柱类型为C18或C8色谱柱，液相色谱仪的柱温为30℃，检测波长为320nm，进样量为5μL，流动相中的A为甲醇、B为体积百分含量0.4%的磷酸；采用液相色谱仪对样液进行测定后，得到样液的液相色谱图，根据样液的液相色谱图中Artepillin C所对应的峰面积，结合标准溶液的回归方程y=ax+b，得到样液中Artepillin C的浓度值。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 杭州蜂之语蜂业股份有限公司 高效液相色谱法测定蜂胶中Artepillin C含量的方法

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。

阅读全文 双屏查看 官方信息 专利公告 收藏专利 下载PDF 下载WORD