申请/专利权人：湖南师范大学;中国人民解放军国防科学技术大学

申请日：2010-11-30

公开（公告）日：2013-09-18

公开（公告）号：CN102050874B

主分类号：C07K14/435(2006.01)I

分类号：C07K14/435(2006.01)I

优先权：

专利状态码：失效-未缴年费专利权终止

法律状态：2016.01.20#未缴年费专利权终止;2013.09.18#授权;2011.06.29#实质审查的生效;2011.05.11#公开

摘要：本发明公开了一种虎纹捕鸟蛛毒素-XVI，是从虎纹捕鸟蛛粗毒中经离子交换和反相高效液相色谱分离提纯得到的，其一级结构由39个氨基酸残基组成，含有6个半胱氨酸并形成三对二硫键，分子量为4437.4Da；该毒素纯化冻干粉的理化性状为白色或类白色疏松体，无气味，极易溶解于水，水溶液近于无色透明；对大鼠背根神经元N-型钙通道的半数最大抑制浓度为60nmolL，是一种很强的选择性作用于N-型钙通道的抑制剂。

主权项：一种虎纹捕鸟蛛毒素‑XVI的制备方法，其特征在于包括如下步骤： （1）阳离子交换柱层析, 称取粗毒溶于双蒸水并离心，取上清液进样,在配备有486紫外检测器的蛋白质纯化系统上，采用Waters CM填料，使用Waters P‑1 型阳离子交换柱进行阳离子交换层析；采用四元梯度洗脱：A0.1molL 磷酸二氢钠，B0.1 molL磷酸氢二钠，C 1.0 molL 氯化钠；D 双蒸水，其中A液和B液用来调节洗脱液的pH值，采用氯化钠梯度洗脱；在280 nm波长室温检测并收集所有被洗脱峰，找出目的峰后再进一步进行反相脱盐处理；（2）收集目的峰，脱盐纯化在高效液相色谱工作站上进行，采用分离柱为Phenomenex C18柱，先用100% ddH2O冲洗20 min，将混在样品中的盐分洗涤干净之后，用乙腈溶液进行梯度洗脱,流速为3.0 mLmin，检测波长为280215 nm，柱温为室温，收集每个洗脱峰，用质谱鉴定所含成分的分子量，找出含有HWTX‑XVI的洗脱峰并进行冷冻干燥；（3）目的样品再在高效液相色谱工作站或者反相HPLC纯化系统上进行纯化，分离柱为Phenomenex C18柱，收集洗脱峰，并用MALDI‑TOF质谱仪鉴定样品的纯度，获得虎纹捕鸟蛛毒素‑XVI；（4）对步骤（3）获得的虎纹捕鸟蛛毒素‑XVI，进行序列测定，其氨基酸序列如下：Cys Ile Gly Glu Gly Val Pro Cys Asp Glu Asn Asp Pro Arg Cys Cys Ser Gly Leu Val Cys Leu Lys Pro Thr Leu His Gly Ile Trp Tyr Lys Ser Tyr Tyr Cys Tyr Lys Lys。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 湖南师范大学;中国人民解放军国防科学技术大学 虎纹捕鸟蛛毒素-XVI的制备方法

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。

阅读全文 双屏查看 官方信息 专利公告 收藏专利 下载PDF 下载WORD