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【发明公布】一种提取梵净山绿茶氨基酸工艺_铜仁学院_201810900636.X 

申请/专利权人:铜仁学院

申请日:2018-08-09

公开(公告)日:2019-01-18

公开(公告)号:CN109232326A

主分类号:C07C279/14(2006.01)I

分类号:C07C279/14(2006.01)I;C07C277/06(2006.01)I

优先权:

专利状态码:失效-发明专利申请公布后的驳回

法律状态:2022.05.06#发明专利申请公布后的驳回;2019.02.19#实质审查的生效;2019.01.18#公开

摘要:本发明公开了一种提取梵净山绿茶氨基酸工艺,包括以下步骤:1原料预处理:将绿茶作为原料用石油醚浸泡除脂,干燥后粉碎备用;2绿茶氨基酸浸提;3将步骤2中得到的提取液4000rmin离心,取上清液;4脱色:在步骤3中得到的溶液中按0.05gmL加入活性碳75℃水浴30min进行脱色;5提取液吸光度测定:将步骤4中处理后的样品,取2mL加入1mL2%茚三酮水溶液和0.5mL、PH=6.8磷酸缓冲液75℃水浴5min。本本发明以超声辅助浸提法提取绿茶中游离氨基酸,分别提取温度、提取时间、超声功率、乙醇体积分数等因素进行单因素探讨,并通过正交实验得到的最佳提取工艺,提取快速。

主权项:1.一种提取梵净山绿茶氨基酸工艺,其特征在于,包括以下步骤:1原料预处理:将绿茶作为原料用石油醚浸泡除脂,干燥后粉碎备用;2绿茶氨基酸浸提:a、将步骤1中制得的原料加入浓度分数为10%~50%的乙醇溶液中震荡均匀,其中绿茶粉状原料与乙醇溶液的比,即料液比1:10gmL;b、将步骤a中得到的固液混合物超声提取20~40min后即为绿茶氨基酸提取液,其中,浸提温度25℃~45℃,超声功率260W~520W;3将步骤2中得到的提取液4000rmin离心,取上清液;4脱色:在步骤3中得到的溶液中按0.05gmL加入活性碳75℃水浴30min进行脱色,4000rmin离心取上清液;5提取液吸光度测定:将步骤4中处理后的样品,取2mL加入1mL2%茚三酮水溶液和0.5mL、PH=6.8磷酸缓冲液75℃水浴5min;测紫外吸光度值,计算氨基酸浓度得出最佳提取条件,工艺完成。

全文数据:一种提取梵净山绿茶氨基酸工艺技术领域本发明涉及绿茶氨基酸提取技术领域,尤其涉及一种提取梵净山绿茶氨基酸工艺。背景技术氨基酸是具有氨基和羧基的有机化合物,是组成蛋白质的基本单位,它参与生物体内的新陈代谢和生理过程。茶叶中的氨基酸茶氨酸,不仅是决定茶汤滋味的主要成分,而且与茶叶的品质有一定的相关性,同时又是人体所必需的营养物质,对人体疾病的预防和康复起着极为重要的作用。大量研究表明,茶氨酸具有降血压、调节脑内神经传达物质变化、提高学习能力好记忆、镇定、保护神经细胞等功效。因此,测定茶叶中氨基酸的含量对茶叶的开发利用具有重要意义。发明内容本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点,而提出的一种提取梵净山绿茶氨基酸工艺。为了实现上述目的,本发明采用了如下技术方案:设计一种提取梵净山绿茶氨基酸工艺,包括以下步骤:1原料预处理:将绿茶作为原料用石油醚浸泡除脂,干燥后粉碎备用;2绿茶氨基酸浸提:a、将步骤1中制得的原料加入浓度分数为10%~50%的乙醇溶液中震荡均匀,其中绿茶粉状原料与乙醇溶液的比,即料液比1:10gmL;b、将步骤a中得到的固液混合物超声提取20~40min后即为绿茶氨基酸提取液,其中,浸提温度25℃~45℃,超声功率260W~520W;3将步骤2中得到的提取液4000rmin离心,取上清液;4脱色:在步骤3中得到的溶液中按0.05gmL加入活性碳75℃水浴30min进行脱色,4000rmin离心取上清液;5提取液吸光度测定:将步骤4中处理后的样品,取2mL加入1mL2%茚三酮水溶液和0.5mL、PH=6.8磷酸缓冲液75℃水浴5min;测紫外吸光度值,计算氨基酸浓度得出最佳提取条件,工艺完成。优选的,当所述步骤2中的乙醇体积分数20%,提取时间30min、提取温度35℃、超声功率455W,此时绿茶中水氨基酸的提取率为1.914%。优选的,所述提取梵净山绿茶氨基酸工艺,包括以下步骤:1原料预处理:将绿茶作为原料用石油醚浸泡除脂,干燥后粉碎备用;2绿茶氨基酸浸提:a、将步骤1中制得的原料加入浓度分数为10%的乙醇溶液中震荡均匀,其中绿茶粉状原料与乙醇溶液的比即料液比1:10gmL;b、将步骤a中得到的固液混合物超声提取20min后即为绿茶氨基酸提取液,其中,浸提温度25℃,超声功率325W;3将步骤2中得到的提取液4000rmin离心,取上清液;4脱色:在步骤3中得到的溶液中按0.05gmL加入活性碳75℃水浴30min进行脱色,4000rmin离心取上清液;5提取液吸光度测定:将步骤4中处理后的样品,取2mL加入1mL2%茚三酮水溶液和0.5mL、PH=6.8磷酸缓冲液75℃水浴5min;测紫外吸光度值,计算氨基酸浓度得出最佳提取条件,工艺完成。优选的,所述提取梵净山绿茶氨基酸工艺,包括以下步骤:1原料预处理:将绿茶作为原料用石油醚浸泡除脂,干燥后粉碎备用;2绿茶氨基酸浸提:a、将步骤1中制得的原料加入浓度分数为20%的乙醇溶液中震荡均匀,其中绿茶粉状原料与乙醇溶液的比即料液比1:10gmL;b、将步骤a中得到的固液混合物超声提取25min后即为绿茶氨基酸提取液,其中,浸提温度30℃,超声功率390W;3将步骤2中得到的提取液4000rmin离心,取上清液;4脱色:在步骤3中得到的溶液中按0.05gmL加入活性碳75℃水浴30min进行脱色,4000rmin离心取上清液;5提取液吸光度测定:将步骤4中处理后的样品,取2mL加入1mL2%茚三酮水溶液和0.5mL、PH=6.8磷酸缓冲液75℃水浴5min;测紫外吸光度值,计算氨基酸浓度得出最佳提取条件,工艺完成。优选的,所述提取梵净山绿茶氨基酸工艺,包括以下步骤:1原料预处理:将绿茶作为原料用石油醚浸泡除脂,干燥后粉碎备用;2绿茶氨基酸浸提:a、将步骤1中制得的原料加入浓度分数为20%的乙醇溶液中震荡均匀,其中绿茶粉状原料与乙醇溶液的比即料液比1:10gmL;b、将步骤a中得到的固液混合物超声提取30min后即为绿茶氨基酸提取液,其中,浸提温度35℃,超声功率455W。3将步骤2中得到的提取液4000rmin离心,取上清液。4脱色:在步骤3中得到的溶液中按0.05gmL加入活性碳75℃水浴30min进行脱色,4000rmin离心取上清液;5提取液吸光度测定:将步骤4中处理后的样品,取2mL加入1mL2%茚三酮水溶液和0.5mL、PH=6.8磷酸缓冲液75℃水浴5min;测紫外吸光度值,计算氨基酸浓度得出最佳提取条件,工艺完成。本发明提出的一种提取梵净山绿茶氨基酸工艺,以超声辅助浸提法提取绿茶中游离氨基酸,分别提取温度、提取时间、超声功率、乙醇体积分数等因素进行单因素探讨,并通过正交实验得到的最佳提取工艺,提取快速。附图说明图1为乙醇体积分数对游离氨基酸提取率的影响数据分析图。图2为超声时间对游离氨基酸提取率的影响数据分析图。图3为超声温度对游离氨基酸提取率的影响数据分析图。图4为超声功率对游离氨基酸提取率的影响数据分析图。图5为本发明精氨酸浓度与吸光度值的数据分析图。具体实施方式下面结合具体实施例来对本发明做进一步说明。实施例一一种提取梵净山绿茶氨基酸工艺,包括以下步骤:1原料预处理:将绿茶作为原料用石油醚浸泡除脂,干燥后粉碎备用;2绿茶氨基酸浸提:a、将步骤1中制得的原料加入浓度分数为10%的乙醇溶液中震荡均匀,其中绿茶粉状原料与乙醇溶液的比即料液比1:10gmL;b、将步骤a中得到的固液混合物超声提取20min后即为绿茶氨基酸提取液,其中,浸提温度25℃,超声功率325W;3将步骤2中得到的提取液4000rmin离心,取上清液;4脱色:在步骤3中得到的溶液中按0.05gmL加入活性碳75℃水浴30min进行脱色,4000rmin离心取上清液;5提取液吸光度测定:将步骤4中处理后的样品,取2mL加入1mL2%茚三酮水溶液和0.5mL、PH=6.8磷酸缓冲液75℃水浴5min;测紫外吸光度值,计算氨基酸浓度得出最佳提取条件,工艺完成。实施例二一种提取梵净山绿茶氨基酸工艺,包括以下步骤:1原料预处理:将绿茶作为原料用石油醚浸泡除脂,干燥后粉碎备用;2绿茶氨基酸浸提:a、将步骤1中制得的原料加入浓度分数为20%的乙醇溶液中震荡均匀,其中绿茶粉状原料与乙醇溶液的比即料液比1:10gmL;b、将步骤a中得到的固液混合物超声提取25min后即为绿茶氨基酸提取液,其中,浸提温度30℃,超声功率390W;3将步骤2中得到的提取液4000rmin离心,取上清液;4脱色:在步骤3中得到的溶液中按0.05gmL加入活性碳75℃水浴30min进行脱色,4000rmin离心取上清液;5提取液吸光度测定:将步骤4中处理后的样品,取2mL加入1mL2%茚三酮水溶液和0.5mL、PH=6.8磷酸缓冲液75℃水浴5min;测紫外吸光度值,计算氨基酸浓度得出最佳提取条件,工艺完成。实施例三一种提取梵净山绿茶氨基酸工艺,包括以下步骤:1原料预处理:将绿茶作为原料用石油醚浸泡除脂,干燥后粉碎备用;2绿茶氨基酸浸提:a、将步骤1中制得的原料加入浓度分数为20%的乙醇溶液中震荡均匀,其中绿茶粉状原料与乙醇溶液的比即料液比1:10gmL;b、将步骤a中得到的固液混合物超声提取30min后即为绿茶氨基酸提取液,其中,浸提温度35℃,超声功率455W。3将步骤2中得到的提取液4000rmin离心,取上清液。4脱色:在步骤3中得到的溶液中按0.05gmL加入活性碳75℃水浴30min进行脱色,4000rmin离心取上清液;5提取液吸光度测定:将步骤4中处理后的样品,取2mL加入1mL2%茚三酮水溶液和0.5mL、PH=6.8磷酸缓冲液75℃水浴5min;测紫外吸光度值,计算氨基酸浓度得出最佳提取条件,工艺完成。经测定,当步骤2中的乙醇体积分数20%、提取时间30min、提取温度35℃、超声功率455W时,试验提取效果为最佳,此时,绿茶中水氨基酸的提取率为1.914%,实施例三为最佳方案。1.1本发明还公布了核心工艺的实验方法1.1.1游离氨基酸的提取工艺流程原料预处理石油醚除脂,干燥后粉碎备用→游离氨基酸浸提20%乙醇、30min、35℃、455W超声浸提,制得游离氨基酸提取液→真空抽滤,取溶液→脱色活性炭脱色,并按1:20的比例加入活性炭→抽滤洗涤取溶液,制得游离氨基酸溶液。1.1.2游离氨基酸的单因素实验1.1.2.1乙醇体积分数对提取率的影响称取5份预处理后的绿茶各1.00g,乙醇体积分数分别为10%、20%、30%、40%、50%,料液比为1:10gmL,提取时间为30min,提取温度为35℃,提取功率为390W,按照1.1.1的方法进行实验,探讨不同乙醇体积分数对其提取率的影响。1.1.2.2提取时间对提取率的影响称取5份预处理后的绿茶各1.00g,提取时间分别为20、25、30、35、40min,料液比为1:10gmL,乙醇体积分数为20%,提取功率为390W,提取温度为35℃,按照1.1.1的方法进行实验,探讨不同提取时间对其提取率的影响。1.1.2.3提取温度对提取率的影响称取5份预处理后的绿茶各1.00g,提取温度分别为25、30、35、40、45℃,料液比为1:10gmL,乙醇体积分数为20%,提取功率为390W,提取时间为25min按照1.1.1的方法进行实验,探讨不同提取温度对其提取率的影响。1.1.2.4提取功率对提取率的影响取5份预处理后的茶渣各1.00g,提取功率分别为260、325、390、455、520W,料液比为1:10gmL,乙醇体积分数为20%,提取时间为25min提取温度为30℃按照1.1.1的方法进行实验,探讨不同提取功率对其提取率的影响。1.1.3正交实验根据单因素实验结果,以乙醇体积分数、提取时间、提取温度、提取功率四个因素为变量,以绿茶提取液中氨基酸含量和提取率为指标值进行优化.采用4因素3水平的正交实验分析方法求取优化的工艺参数,实验因素和水平设计见表1正交实验设计及实验结果见表2。2结果与分析2.1单因素实验2.1.1乙醇体积分数对提取率的影响按照1.1.1中的实验方法,探讨乙醇体积分数对绿茶氨基酸提取率的影响,结果如图1所示。由图1可知,乙醇体积分数为20%时提取率最高,当乙醇体积分数高于20%时,随着乙醇体积分数的增加,提取率逐渐降低。因此,选择体积分数为20%左右的乙醇作为提取剂较为适宜。2.2.2提取时间对提取率的影响按照1.1.1中的实验方法,探讨提取时间对绿茶氨基酸提取率的影响,结果如图2所示。由图2可知,在25min以前提取率随时间增大而增大,当提取时间在25min~40min时氨基酸提取率随时间增加总体呈下降趋势。因此,选择提取时间为25min左右较为适宜。2.2.3提取温度对提取率的影响按照1.1.1中的实验方法,探讨提取时间对绿茶氨基酸提取率的影响,结果如图3所示。由图3可知,在30℃以前提取率随时间增大而增大,当提取温度在30~45℃时随提取温度的升高绿茶氨基酸提取率明显降低,可能是绿茶提取液中含热稳定性较差的氨基酸在温度升高时己被分解。因此,选择提取温度为30℃左右较为适宜。2.2.4超声功率对提取率的影响按照1.1.1中的实验方法,探讨超声功率对绿茶氨基酸提取率的影响,结果如图4所示。由图4可知,当提取功率在260~390W时随着提取功率的升高提取液中氨基酸提取率呈上升趋势,当在390W时提取率最高,390W以后提取率随功率增加而减小。因此,选择超声功率为390W左右较为适宜。2.3正交验证性实验根据单因素实验结果,以乙醇体积分数、提取时间、提取温度、提取功率四个因素为变量,以绿茶提取液中氨基酸含量和提取率为指标值进行优化.采用4因素3水平的正交实验分析方法求取优化的工艺参数,实验因素和水平设计见表1.正交实验设计及实验结果见表2.验证性实验结果见表3。表1正交因素水平表表2正交实验设计及结果表3验证性实验由表1和表2可知,最佳提取条件为A2B3C3D3即乙醇体积分数20%、提取时间30min、提取温度35℃、超声功率455W。在此条件下,重复实验5次,氨基酸的平均提取率为1.914%,比正交实验中90%实验组的提取率高,以及相对标准偏差为0.21%,说明该工艺条件下提取绿茶中游离氨基酸的工艺稳定可行。以上所述,仅为本发明较佳的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变,都应涵盖在本发明的保护范围之内。

权利要求:1.一种提取梵净山绿茶氨基酸工艺,其特征在于,包括以下步骤:1原料预处理:将绿茶作为原料用石油醚浸泡除脂,干燥后粉碎备用;2绿茶氨基酸浸提:a、将步骤1中制得的原料加入浓度分数为10%~50%的乙醇溶液中震荡均匀,其中绿茶粉状原料与乙醇溶液的比,即料液比1:10gmL;b、将步骤a中得到的固液混合物超声提取20~40min后即为绿茶氨基酸提取液,其中,浸提温度25℃~45℃,超声功率260W~520W;3将步骤2中得到的提取液4000rmin离心,取上清液;4脱色:在步骤3中得到的溶液中按0.05gmL加入活性碳75℃水浴30min进行脱色,4000rmin离心取上清液;5提取液吸光度测定:将步骤4中处理后的样品,取2mL加入1mL2%茚三酮水溶液和0.5mL、PH=6.8磷酸缓冲液75℃水浴5min;测紫外吸光度值,计算氨基酸浓度得出最佳提取条件,工艺完成。2.根据权利要求1所述的一种提取梵净山绿茶氨基酸工艺,其特征在于,当所述步骤2中的乙醇体积分数20%,提取时间30min、提取温度35℃、超声功率455W,此时绿茶中水氨基酸的提取率为1.914%。3.根据权利要求1所述的一种提取梵净山绿茶氨基酸工艺,其特征在于,包括以下步骤:1原料预处理:将绿茶作为原料用石油醚浸泡除脂,干燥后粉碎备用;2绿茶氨基酸浸提:a、将步骤1中制得的原料加入浓度分数为10%的乙醇溶液中震荡均匀,其中绿茶粉状原料与乙醇溶液的比即料液比1:10gmL;b、将步骤a中得到的固液混合物超声提取20min后即为绿茶氨基酸提取液,其中,浸提温度25℃,超声功率325W;3将步骤2中得到的提取液4000rmin离心,取上清液;4脱色:在步骤3中得到的溶液中按0.05gmL加入活性碳75℃水浴30min进行脱色,4000rmin离心取上清液;5提取液吸光度测定:将步骤4中处理后的样品,取2mL加入1mL2%茚三酮水溶液和0.5mL、PH=6.8磷酸缓冲液75℃水浴5min;测紫外吸光度值,计算氨基酸浓度得出最佳提取条件,工艺完成。4.根据权利要求1所述的一种提取梵净山绿茶氨基酸工艺,其特征在于,包括以下步骤:1原料预处理:将绿茶作为原料用石油醚浸泡除脂,干燥后粉碎备用;2绿茶氨基酸浸提:a、将步骤1中制得的原料加入浓度分数为20%的乙醇溶液中震荡均匀,其中绿茶粉状原料与乙醇溶液的比即料液比1:10gmL;b、将步骤a中得到的固液混合物超声提取25min后即为绿茶氨基酸提取液,其中,浸提温度30℃,超声功率390W;3将步骤2中得到的提取液4000rmin离心,取上清液;4脱色:在步骤3中得到的溶液中按0.05gmL加入活性碳75℃水浴30min进行脱色,4000rmin离心取上清液;5提取液吸光度测定:将步骤4中处理后的样品,取2mL加入1mL2%茚三酮水溶液和0.5mL、PH=6.8磷酸缓冲液75℃水浴5min;测紫外吸光度值,计算氨基酸浓度得出最佳提取条件,工艺完成。5.根据权利要求1所述的一种提取梵净山绿茶氨基酸工艺,其特征在于,包括以下步骤:1原料预处理:将绿茶作为原料用石油醚浸泡除脂,干燥后粉碎备用;2绿茶氨基酸浸提:a、将步骤1中制得的原料加入浓度分数为20%的乙醇溶液中震荡均匀,其中绿茶粉状原料与乙醇溶液的比即料液比1:10gmL;b、将步骤a中得到的固液混合物超声提取30min后即为绿茶氨基酸提取液,其中,浸提温度35℃,超声功率455W。3将步骤2中得到的提取液4000rmin离心,取上清液。4脱色:在步骤3中得到的溶液中按0.05gmL加入活性碳75℃水浴30min进行脱色,4000rmin离心取上清液;5提取液吸光度测定:将步骤4中处理后的样品,取2mL加入1mL2%茚三酮水溶液和0.5mL、PH=6.8磷酸缓冲液75℃水浴5min;测紫外吸光度值,计算氨基酸浓度得出最佳提取条件,工艺完成。

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