【发明授权】一种新型X射线激发光动力学治疗深部肿瘤的纳米粒-光敏剂耦合系统及其应用_中国人民解放军第四军医大学_201810698789.0 

申请/专利权人:中国人民解放军第四军医大学

申请日:2018-06-29

发明/设计人:卢虹冰;张文立;张晓峰;戎军艳;高鹏;刘天帅;兰斌;刘文磊

公开(公告)日:2021-02-19

代理机构:北京精金石知识产权代理有限公司

公开(公告)号:CN108785672B

代理人:强红刚

主分类号:A61K41/00(20200101)

地址:710032 陕西省西安市长乐西路127号

分类号:A61K41/00(20200101);A61K47/52(20170101);A61K47/69(20170101);A61P35/00(20060101)

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2021.02.19#授权;2018.12.07#实质审查的生效;2018.11.13#公开

摘要:本发明提供了一种新型X射线激发光动力学治疗深部肿瘤的纳米粒‑光敏剂耦合系统及其应用,该系统是将下转换β‑NaLuF4:X%Tb3+纳米粒经AEP修饰后,加入EDC作为激活剂,使发光纳米粒与亲水性光敏剂单步共价耦合而得,其中X=3~25。本发明的耦合系统与肝癌细胞共培养,结果显示耦合系统可通过经典的胞吞方式进入细胞,并稳定停留在内涵体溶酶体等小泡结构中,较NaGdF4:Tb3+‑RB耦合系统而言,NaLuF4Tb3+‑RB耦合系统不但可以产生更过的ROS,而且在提高FRET效应的同时可大幅降低X射线的照射剂量。

主权项:1.一种X射线激发光动力学治疗深部肿瘤的纳米粒-光敏剂耦合系统,其特征在于,该系统是将下转换β-NaLuF4:X%Tb3+纳米粒经AEP修饰后,加入EDC作为激活剂,使发光纳米粒与亲水性光敏剂单步共价耦合而得,其中X=3~18,所述的AEP为2-氨基乙基膦酸,所述的EDC为1-3-二甲氨基丙基-3-乙基碳二亚胺盐酸盐,所述的亲水性光敏剂是在490-540nm处有吸收的光敏剂。

全文数据:一种新型X射线激发光动力学治疗深部肿瘤的纳米粒-光敏剂耦合系统及其应用技术领域[0001]本发明属于生物医学材料技术领域,具体而言,涉及一种用于X射线激发光动力学治疗深部肿瘤的新型纳米粒Nanoparticles,NPs-光敏剂耦合系统,以及该系统的制备方法和生物应用。背景技术[0002]光动力学治疗PhotodynamicTherapy,roT是上个世纪七十年代末开设形成的一项肿瘤治疗新技术,在美、英等不少国家已获得国家政府相关部门的正式批准,成为治疗肿瘤的一项常规手段。与传统的手术、化疗、放疗等治疗手段相比,其具有创伤较小、毒性低微、选择性好、适用性好等优点。其基本原理是:生物组织中的内源性或外源性光敏物质受到相应波长可见光、近红外光或紫外光光照时,吸收光子能量,由基态变成激发态,处于激发态的光敏物质很不稳定,迅速经过物理退激或化学退激过程释放出能量而返回基态,其物理退激过程可产生荧光,通过分析荧光光谱能进行疾病的诊断;而其化学退激过程可以生成大量活性氧物种ReactiveOxygenSpecies,R0S,其中最主要的是单线态氧,活性氧能与多种生物大分子相互作用,损伤肿瘤细胞结构或影响细胞功能,从而产生治疗效果。但是激发光的组织穿透能力和光敏剂的吸收波长阻碍了传统PDT对深部或较大肿瘤的有效治疗,临床应用极大受限。[0003]近年来,基于x射线直接激发光敏剂或以x射线激发纳米闪烁体作为能量传递介质间接激发光敏剂的X射线激发的光动力治疗方法x-rayExcitedPhotodynamicTherapy,XE-PDT成为深层肿瘤治疗领域的研宄热点。由于X射线高穿透能力,光敏剂对X射线的直接吸收率低,因此X射线直接激发的光敏剂相对较少,目前主要是以X射线激发发光纳米粒子作为能量介质,依赖发光纳米粒与光敏剂之间的能量传递间接激发光敏剂。具体实现如下:首先,选择光谱相匹配的发光纳米粒与光敏剂,通过自组装或共价耦合的方式生成发光纳米耦合系统;然后,通过靶向分子引导纳米粒-光敏剂耦合系统在肿瘤部位富集;再者,用X射线激发被包裹的发光纳米粒发光,将能量传递给光敏剂产生光动力效应。因此,研制出一种发光光谱与光敏剂吸收光谱高度吻合且生物安全性好、光产额较高的发光纳米粒,并将其与成熟光敏剂进行耦合是XE-PDT的关键问题。[0004]稀土元素掺杂的核壳结构是掺杂镧系元素的主体材料的无机纳米粒子组成内核,外壳被非掺杂的稀土化合物包围。这种含重金属的核壳纳米材料对X射线有很强的阻挡和吸收作用,因而常被用作X射线激发憐光材料NacrzynskiDJ,etc.NanoLett.2015,151:96。2006年,UniversityofTexasatArlington的WeiChen教授首次提出了XE-PDTChen,W.etc_JournalofNanoscienceandNanotechnology,2006_64:p_1159-1166,使用X射线作为激光光源,通过激发LaCh:Ce3+纳米粒发出可见光用于激发親合在LaCh:Ce3+表面的传统光敏剂P卜啉衍生物通过共价键结合,并修饰靶向基团将光敏剂递送到治疗部位,然后通过发光纳米粒吸收X射线并发射紫外光激活有限距离内的光敏剂产生单态氧,证买该方法不仅可以利用光敏剂的靶向性实现治疗局域化,减少对正常细胞的损伤,同时还可以提尚穿透深度使其适用于深部肿瘤治疗。2018年,Chang-ChiehHsu等人提出了基于核-壳-壳结构的纳米发光颗粒NaLuF4:35%Gd3+,15%Eu3+@NaLuF4:40%Gd3+_aLuF4:35%Gd3,15%Tb3用于XE-PDT和生物成像等方面(Chang-ChiehHsu,etc.JournalofACSAppliedMaterialsInterfaces,2018_2,在X射线激发下,这种发光纳米颗粒可以从Tb3+中发出波长为543nm的可见光用于激发与之相耦合的玫瑰红光敏剂产生R〇s,可有效杀死MDA-MB-231和MCF-7肿瘤细胞。同时,该親合系统可以从Eu3+中发出波长为614nm,695nm的可见光用于生物成像。该型I禹合系统的FRETFluorescenceResonanceEnergyTransfer效应仅有82.7%,XE-PDT的照射剂量高达l-5Gy,照射后肿瘤细胞活性分别为80%lGy,7〇%5Gy,抗肿瘤疗效和毒副作用非常不理想。因此,如何有效增加耦合系统的FRET效应,在确保有效杀死肿瘤细胞的前提下最大程度地降低X射线照射剂量是急需解决的现实问题。本发明的提出有效解决了这一问题。发明内容[0005]鉴于现有技术的不足,本发明的首要目的在于提供一种较低剂量XE-PDT治疗深部肿瘤的新型纳米粒Nanoparticles,NPs-光敏剂耦合系统。[0006]为了实现本发明的目的,发明人对NaLuF4系列发光纳米粒进行了深入研究,意外地发现通过改变掺杂稀土离子为Tb3+,使其发射光谱与成熟二代光敏剂玫瑰红(RoseBengal,㈣吸收光谱高度吻合,较NaGdF4:Tb3+-RB耦合系统而言,NaLuF4Tb3+-RB耦合系统不但可以产生更多的R0S,而且在提高FRET效应的同时可大幅降低X射线的照射剂量,较好地实现了本发明的目的。[0007]具体地,本发明的技术方案概况如下:一种新型X射线激发光动力学治疗深部肿瘤的纳米粒-光敏剂耦合系统,是将下转换0-NaLuF4:X%Tb3+纳米粒经AEP修饰后,加入mC作为激活剂,使发光纳米粒与亲水性光敏剂单步共价耦合而得,其中X=3〜25,AEP为2-氨基乙基膦酸(2-Aminoethylphosphonicacid,AEP,EDC为1-3_二甲氨基丙基-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(N-3-Dimethy1aminopropyl-N-ethylcarbodiimidehydrochloridecrystal1ine,EDC,亲水性光敏剂是在490-540nm处有吸收的光敏剂。[0008]需要说明的是,试验中发现,将0-NaLuF4:X%Tb3+纳米粒表面油酸基团AEP进行配体交换后修饰,可以使纳米粒具备良好的水溶性和生物安全性,在较低剂量X射线照射下更安全高效的抑制或杀死癌细胞。[0009]进一步优选地,如上所述x射线激发光动力学治疗深部肿瘤的新型纳米粒-光敏剂耦合系统,其中优选X二3〜18,进一步优选x=7〜15。[0010]在本发明的一个最优选的试验处理组中,如上所述x射线激发光动力学治疗深部肿瘤的新型纳米粒-光敏剂耦合系统,其中X=15。[0011]在本发明的一个最优选的试验处理组中,如上所述X射线激发光动力学治疗深部肿瘤的新型纳米粒-光敏剂耦合系统,其中的亲水性光敏剂为RB、MC540或其它在490-560mn处有吸收谱的光敏剂。[0012]进一步优选地,如上所述X射线激发光动力学治疗深部肿瘤的新型纳米粒-光敏剂耦合系统,其中e-NaLuF4:X%Tb3+与AEP、EDC的质量比为1:3〜5:0_8〜2。[0013]再进一步优选地,如上所述X射线激发光动力学治疗深部肿瘤的新型纳米粒-光敏剂耦合系统,其中P-NaLuF4:X%Tb3+、AEP、EDC及RB的质量比为1:3〜5:0.8〜2:0.004〜0.006。[0014]另外,本发明的第二个目的在于提供上述X射线激发光动力学治疗深部肿瘤的新型纳米粒-光敏剂耦合系统的制备方法,该方法包括如下步骤:[0015]1取P-NaLuF4:X%Tb3+纳米粒和AEP分散在醇溶液中,混合形成均一溶液,在室温下搅拌反应12〜36小时后,离心得到经AEP修饰的纳米粒;[0016]2取AEP修饰的纳米粒与光敏剂玫瑰红混合于水中,加入EDC作为激活剂,室温搅拌反应6〜18小时;[0017]3将步骤2的反应液高速离心,速率为12000〜14000rmin,分离出残余溶液中的沉淀物,将沉淀物纯化后获得目标产物。[0018]进一步优选地,如上所述X射线激发光动力学治疗深部肿瘤的新型纳米粒-光敏剂耦合系统的制备方法,其中步骤1中所述的醇溶液为体积分数50%〜70%的乙醇溶液。[0019]本发明所述的NaLuF4:15%Tb3+发光纳米粒-RB親合系统与肝癌细胞OtepG-2共培养,结果显示耦合系统可通过经典的胞吞方式进入细胞,并稳定停留在内涵体溶酶体等小泡结构中。当NaLuF4:15%Tb3+发光纳米粒-RB耦合系统溶液浓度比为20:1时,单态氧产生率达到峰值。通过荷瘤裸鼠实验,可检测出该型纳米粒-光敏剂耦合系统在不同X射线照射时间下均呈现出显著的治疗效果,对肿瘤的生长起到了非常显著的抑制作用。因此,本发明还提供了上述的新型纳米粒-光敏剂耦合系统在制备X射线激发光动力学治疗肿瘤的药剂中应用。进一步优选地,所述的肿瘤为包括肝癌在内的深部肿瘤,以及浅表肿瘤。[GGM]与现有技术相比,本发明涉及的新型纳米粒-光敏剂耦合系统用于X射线激发光动力学治疗肿瘤时具有如下优点和进步性:[0021]⑴本发明的P-NaLuF4:15%Tb3+纳米粒的发射光谱与成熟二代光敏剂RB的吸收光谱高度吻合,经X射线照射后可产生更多的R0S,能够有效杀死90%以上肝癌细胞,较NaGdF4:Tb3+-RB耦合系统而言,NaLuF4Tb3+-RB耦合系统不但可以产生更过的R0S,而且在提高FRET效应的同时可大幅降低X射线的照射剂量。[0022]2本发明的P-NaLuF4:15%Tb3+-RB耦合系统在光动力学治疗深部肿瘤时,所需X射线照射的辐射剂量非常低,使用电离室测得平均每次每小时照射剂量为〇.17Gy。[0023]⑶本发明的P_NaLuF4:15%Tb3+-RB耦合系统具有较好的生物安全性,体外细胞实验与小鼠体内实验均验证该系统无明显毒性。附图说明[0024]图1:P-NaLuF4:15%Tb3+-RB耦合系统的构建及其治疗机制示意图。[0025]图2:3-NaLuF4:15%Tb3+NPs制备流程示意图。[0026]图3:e-NaLuF4:15%Tb3+NPs的TEM图。[0027]图4:不同反应条件制备的p-NaLuF4:15%Tb3+NPs的XRD图。[0028]图5:不同Tb3+掺杂比例的P-NaLuF4:X%Tb3+光产额对比图。[0029]图6:lmmolNaLuF4:15%Tb3+与lmmol的NaGdF4:15%Tb3+的X射线激发光谱对比分析图。[0030]图7:a为P-NaLuF4:15%Tb3+发光纳米粒的发射光谱及RB吸收光谱图;⑹为荧光分光光度计测得P-NaLuF4:15%Tb3+发光纳米粒与不同浓度rb共价耦合前后的光谱对比图。[0031]图8:DPBF法测定不同浓度0-NaLuF4:15%Tb3+-RB耦合系统溶液中单态氧产生量对比图。[0032]图9:CCK8法测定细胞毒性,未经X射线照射的纳米粒-光敏剂耦合系统与细胞共培养的细胞成活率柱状图。[0033]图1〇:CCK8法检测纳米粒-光敏剂耦合系统给药后,经x射线照射后的细胞成活率图。具体实施方式[0034]本发明研制了一种光谱与RB高度吻合的小尺寸、形状规则、粒径分布均匀、光产额较高的纳米粒0-NaLuF4:X%Tb3+,并与成熟光敏剂进行耦合(由一定几3+掺杂¢-NaLuF4纳米发光材料为基质材料,与RB进行共价耦合),制备出发光核心的发射光谱与RB吸收光谱高度匹配的纳米粒-光敏剂耦合体系。通过X射线激发纳米发光材料,光敏剂吸收发射光后产生R0S,诱导肿瘤细胞凋亡,其整体设计如图丨所示,整个制备和试验思路如下:[0035]1.X射线激发下转换NaLuF4:X%Tb3+发光纳米粒的制备。[0036]主要采用“油热法”制备NaLuF4:X%Tb3+发光纳米粒,并对其进行TEM、XRD检测,分析其晶格结构、颗粒形态以及颗粒直径;使用X射线照射发光纳米粒,分析研宄不同Tb3+掺杂比例的光产额性能。[0037]2•NaLuF4:X%Tb3+发光纳米粒与RB耦合。[0038]通过对已制备的NaLuF4:X%Tb3+发光纳米粒表面进行AEP亲水性修饰,使整个体系保证在高光产额的条件下,具有良好的生物相容性。加入EDC作为激活剂,采用共价耦合酰胺键的方式,使RB稳定地耦合在纳米颗粒表面。[0039]3.NaLuF4:X%Tb3+发光纳米粒-RB耦合系统的单态氧产生量分析。[0040]通过X射线照射NaLuF4:!5%Tb3+纳米粒,稱合系统溶液,运用丄,3_二苯基异苯并呋喃(l,3_diphenylisobenzofuran,DPBF来定量分析溶液中单态氧的产生量。[0041]4.纳米粒-光敏剂耦合系统的生物安全性及胞吞测试。[0042]基于NaLuF4:15%Tb3+-RB耦合系统的单态氧产生量分析结果,将耦合系统与肝癌细胞HepG-2共培养,通过共聚焦显微镜及细胞透射电镜法研究耦合系统的入胞能力,观察其入胞过程。采用CCK8法验证不同浓度耦合系统自身的细胞毒性。[0043]5•纳米粒-光敏剂耦合系统的体外评价。[0044]通过肝癌细胞HepG2检测纳米粒-光敏剂耦合系统体外XE-PDT治疗效果。通过将肝癌细胞HepG2与耦合系统进行共培养24小时,使耦合系统通过EPR效应有效的进入癌细胞内部,并通过照射不同时长的X射线进行XE-PDT的体外治疗。然后使用MTT法来测定细胞的成活率,以此判断耦合系统对肝癌细胞的体外疗效。[0045]上述说明仅是本发明技术方案的概述,为了能够更清楚了解本发明的技术手段,并可依照说明书的内容和本领域的常规技术手段予以实施,下面结合具体的实施例对本发明做进一步详细说明,所述是对本发明的解释而不是限定。[0046]实施例1:X射线激发下转换0-NaLuF4:X%Tb3+发光纳米粒的制备[0047]称量出〇.331g的LuC13•6H20、0.056g的TbCl3•6H2〇的稀土原料和6mL的油酸Oleicacid,0A、15mL的1-十八烯(l-0ctadecene,0DE加入到lOOmL圆底烧瓶中。在氩气保护气氛下加热至160°C反应40分钟,形成均一透明溶液,略微带淡黄色。关闭加热设备,当体系温度降至室温后将溶解在甲醇中的NH4F4mmol,0•1481g、NaOH2.5mmol,0•lg混合溶液缓慢逐滴加入到烧瓶中,时间大约为14分钟。在室温条件下,剧烈搅拌60分钟。升温至10TC进行抽真空操作10分钟。结束后,快速升温至300°C,升温速率为l〇°Cmin,并在此温度保持1小时。待反应结束后降至室温,用无水乙醇、甲醇离心洗涤2次分散在环己烷中,整个0-NaLuF4:X%Tb3+纳米粒制备流程如图2所示。图3是0-NaLuF4:lf5%Tb3+NPs的透射电镜TransmissionElectronMicroscope,TEM图,可以看到NPs的形貌为均一球体,且分散性良好,尺寸在7-10nm。图4是NaLuF4:15%Tb3+的X射线衍射X-raydiffraction,XRD图,从图中可以看出NaLuF4:Tb3+结晶性良好,晶格结构为財目,且与六方相NaLnF4的JCPDS卡片完全匹配。当Tb3+掺杂比例为15%时,光产额最高如图5所示),故将其作为后续体内外研宄的材料基础。同时,在相同的实验条件下,设置X射线源参数为80kV,0.5mA对lmmo1的NaLuF4:15%Tb3+与lmmo1的NaGdF4:15%Tb3+进行激发,经计算NaLuF4:15%Tb3+的光产额值约为1540000,NaGdF4:15%Tb3+的光产额值约为243530,NaLuF4:15%Tb3+与NaGdF4:15%Tb3+的比值为6.32:1,也就是说前者的光产额度要是后者的6•32倍如图6所示)。[0048]实施例2:f3-NaLuF4:15%Tb3+发光纳米粒与RB共价耦合[0049]在50ml圆底烧瓶中加入6ml无水乙醇与4ml蒸馏水,称取将P-NaLuF4:15%Tb3+纳米颗粒10mg,溶于lml的环己烷后加入圆底烧瓶。称取40mgAEP加入圆底烧瓶,在室温下剧烈搅拌24小时后,用蒸馏水离心洗涤3次后重新分散在lml的蒸馏水中,并加入0.05mg光敏剂RB与10mg的激活剂EDC,在室温条件下搅拌12小时,用蒸馏水高速离心洗涤3次,离心速率13000rPm,得到纳米粒-光敏剂耦合系统。[0050]将RB与PNaLuF4:15%Tb3+NPs进行耦合,观察由X射线激发后PNaLuF4:15%Tb3+的发射光谱与RB吸收光谱的匹配程度,分别测定静电吸附与共价耦合的RB吸收峰强度的差异,计算RB结合率,选取最佳的RB耦合方式。通过荧光分光光度法实验分析可得出,经X射线激发后,0-NaLuF4:15%Tb3+NPs的发射光谱与RB的吸收光谱高度匹配如图7a所示),且荧光光谱法测定RB结合率表明,通过共价耦合的方式结合的RB量远高于静电吸附方式,所结合的RB量可完全吸收P_NaLuF4:15%Tb3+NPs发出的发射光如图7b所示)。[0051]实施例3:P-NaLuF4:15%Tb3+发光纳米粒-RB耦合系统的单态氧产生量分析[0052]采用X射线照射耦合P-NaLuF4:15%Tb3+发光纳米粒-RB耦合系统溶液,运用1,3-二苯基异苯并呋喃(1,3-diphenylisobenzofuran,DPBF法来定量分析溶液中单态氧的产生量,实验结果表明,当耦合系统溶液中RB浓度为500ugmL,单态氧产生速率最高,且随着照射时间的延长,其单态氧产生速率不变如图8所示。[G053]实施例4:人体肝癌细胞系IfepG-2细胞复苏、培养和传代[0054]人体肝癌细胞系HepG-2,购自于ThermoFisherScientific公司。取出冻存管后,投入37°C水浴中,震荡解冻2min,酒精消毒管壁外侧后,将其转入超净台中,将管内细胞转移至离心管中,加入5ml37°C预热的含10%胎牛血清的DMEM培养基,并清洗冻存管1次,将离心管离心(1000rpm,5min,弃去上清液,再加入2ml37°C预热的含10%胎牛血清的DMEM培养基,转入培养瓶中,放置于37°C、5%C02饱和湿度的培养箱中孵育,并以0.5%胰蛋白酶洎化开芾规传代。[0055]实施例5:纳米粒-光敏剂耦合系统的肝癌细胞体外评价[0056]基于0-NaLuF4:15%Tb3+发光纳米粒-RB耦合系统的单态氧产生量分析结果,将親合系统与肝癌细胞HepG-2共培养,CCK8法验证耦合系统自身细胞毒性,实验结果表明,单纯稱合系统在未经X射线照射下与细胞共培养,即使高浓度给药组也未显现出明显的细胞毒性如图9所示)。而在x射线照射1个小时,使用电离室测得照射剂量为丨.17Gy,500tlgmL以士浓度的耦合系统给药组均显现出明显的细胞杀伤作用,细胞成活率不足1〇%如图1〇所示),并且对照组CellOnly组与RBOnly组的细胞存活率随乂射线照射时间增长而降低,这是因为X射线本身就具有杀死癌细胞的作用,但是与实验组对比细胞存活率仍有巨大差异。以上结果在体外证明XE-PDT的治疗作用,为体内实验提供给药剂量,x射线照射剂量及照射时间等参数参考。

权利要求:1.一种新型X射线激发光动力学治疗深部肿瘤的纳米粒—光敏剂耦合系统,其特征在于,该系统是将下转换0-NaLuF4:X%Tb3+纳米粒经AEP修饰后,加入EDC作为激活剂,使发光纳米粒与亲水性光敏剂单步共价耦合而得,其中X==3〜25,所述的AEP为2-氨基乙基膦酸,所述的EDC为1-3-二甲氨基丙基-3-乙基碳二亚胺盐酸盐,所述的亲水性光敏剂是在49〇—540nm处有吸收的光敏剂。2.根据权利要求1所述新型X射线激发光动力学治疗深部肿瘤的纳米粒_光敏剂耦合系统,其特征在于,所述的X=3〜18。3.根据权利要求2所述新型X射线激发光动力学治疗深部肿瘤的纳米粒_光敏剂耦合系统,其特征在于,所述的X=7〜15。4.根据权利要求1所述新型X射线激发光动力学治疗深部肿瘤的纳米粒_光敏剂耦合系统,其特征在于,所述的亲水性光敏剂为RB、MC540或和在490-540nm处有吸收的其它光敏剂。~5.根据权利要求1所述新型X射线激发光动力学治疗深部肿瘤的纳米粒_光敏剂親合系统,其特征在于,P-NaLuF4:X%Tb3+与AEP、EDC的质量比为1:3〜5:0.8〜2。6.根据权利要求4所述新型X射线激发光动力学治疗深部肿瘤的纳米粒_光敏剂親合系统,其特征在于,所述的亲水性光敏剂为RB,且P-NaLuF4:X%Tb3+、AEP、EDC及RB的质量比为1:3〜5:0.8〜2:0.004〜0.006。7.根据权利要求1所述新型X射线激发光动力学治疗深部肿瘤的纳米粒-光敏剂親合系统的制备方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:⑴取FNaLuF4:X%Tb3+纳米粒和AEP分散在醇溶液中,混合形成均一溶液,在室温下搅拌反应12〜36小时后,离心得到经AEP修饰的纳米粒;⑵取AEP修饰的纳米粒与亲水性光敏剂玫瑰红混合于水中,加入EDC作为激活剂,室温搅拌反应6〜18小时;3将步骤⑵的反应液高速离心,速率为12000〜1400〇rpm,分离出残余溶液中的沉淀物,将沉淀物纯化后获得目标产物。8.根据权利要求7所述新型X射线激发光动力学治疗深部肿瘤的纳米粒-光敏剂耦合系统的制备方法,其特征在于,步骤⑴中所述的醇溶液为体积分数50%〜70%的乙醇溶液。9.权利要求1所述的纳米粒-光敏剂耦合系统在制备X射线激发光动力学治疗肿瘤的药剂中应用。10.根据权利要求9所述纳米粒-光敏剂耦合系统在制备X射线激发光动力学治疗肿瘤的药剂中应用,其特征在于,所述的肿瘤为包括肝癌在内的深部肿瘤,以及浅表肿瘤。

百度查询: 中国人民解放军第四军医大学 一种新型X射线激发光动力学治疗深部肿瘤的纳米粒-光敏剂耦合系统及其应用

-相关技术