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【发明授权】一种菇肚耳菌株YD99及其栽培方法_黑龙江黑臻生物科技有限公司;李晓_201811179537.3 

申请/专利权人:黑龙江黑臻生物科技有限公司;李晓

申请日:2018-10-10

公开(公告)日:2021-03-19

公开(公告)号:CN109644775B

主分类号:A01G18/00(20180101)

分类号:A01G18/00(20180101);A01G18/20(20180101)

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2021.03.19#授权;2019.05.14#实质审查的生效;2019.04.19#公开

摘要:本发明公开一种菇肚耳菌株YD99及其栽培方法。本发明提供的菇肚耳菌株YD99,属于皱木耳(Auriculariadelicata),保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所,保藏编号为CGMCCNO.16099,保藏日期为2018年8月31日。本发明获得了皱木耳菇肚耳菌株YD99,满足了市场多样性需求,并且该菌株具有商品性好,干耳泡发率高。子实体胶质,品质优、营养好、产量高、商品性佳且市场前景好的特点。

主权项:1.一种菇肚耳菌株,其特征在于,所述菇肚耳菌株为YD99,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所,保藏编号为CGMCCNO.16099,保藏日期为2018年8月31日,生物学分类命名为皱木耳,拉丁文名称Auriculariadelicata。

全文数据:一种菇肚耳菌株YD99及其栽培方法技术领域本发明涉及食用菌技术领域,尤其涉及一种菇肚耳菌株YD99及其栽培方法。背景技术食用菌是指可供人们食用的一类大型真菌,它们具有肉眼可见、徒手可摘的特点,具有不同形状的子实体。皱木耳(拉丁文名称Auriculariadelicata),隶属于担子菌门(Basidiomycota)、蘑菇纲(Agaricomycetes)、木耳目(Ariculariales)、木耳科(Auriculariaceae)、木耳属(Auricularia)。又名网木耳(福建)、多皱木耳(山东)、砂耳(广西)、构耳(神农架)、朱耳(云南)等。中国是世界上最早栽培木耳的国家,在我国人工栽培已有1000多年的历史,公元7世纪,唐甄权《药性论》(约581-618)中就有人工栽培木耳的记载。目前,随着食用菌产业的蓬勃发展,木耳属真菌在我国已广泛栽培,创造了极大的经济价值和社会价值。2017年,我国黑木耳总产量达到600多万吨,是世界第四大栽培食用菌。然而在所有已知食用菌中,人工驯化培养可形成子实体的食用菌约80种,具有商品价值可规模化生产的食用菌有50种,已用于加工生产保健食品和药品的食用菌近30种。由此可见,本领域急待发现可供人类栽培食用的优质食用菌新菌种。皱木耳具有食药兼具的优势,主要分布于热带及亚热带,在我国主要分布于南岭以南地区,生长在阔叶树的腐木上,具有润肺补血、降压、止咳、通便治痔的作用,能提高机体免疫力并对冠心病、动脉硬化等病症具有很好的防治作用。由于皱木耳子实体表面具有明显的皱孔,所以极易与木耳属的其他种类区分。虽然皱木耳商品性状优良,在我国南方分布较广,但尚未形成商品性生产,因此皱木耳具有非常重要的栽培价值。随着人们生活水平的提高,越来越多的人开始意识到食用菌食疗保健方面的作用,但由于现有技术对野生食用菌驯化栽培技术有限,使得目前可用于人工栽培的野生食用菌品种较少。因此食用菌人工可栽培品种的发现及其栽培方法还有待于发展。发明内容鉴于上述现有技术的不足,本发明的目的在于提供一种菇肚耳菌株YD99及其栽培方法,旨在解决现有生产中使用的皱木耳菌株存在着的不易人工栽培,在人工栽培过程中不易出耳、产量低、品质差的问题。本发明的技术方案如下:本发明提供一种菇肚耳菌株YD99,属于皱木耳,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所,保藏编号为CGMCCNO.16099,保藏日期为2018年8月31日,生物学分类命名为皱木耳(拉丁文名称Auriculariadelicata)。本发明菇肚耳菌株YD99是通过皱木耳菌株驯化栽培后,再经系统选育获得。本发明菇肚耳菌株YD99的特征在于:1.形态特征菇肚耳菌株YD99的菌丝:菌丝体洁白、纤细,均匀一致,平贴培养基生长,菌落边缘整齐,出耳后,商品性好,干耳泡发率高。子实体胶质,耳形或圆形,无柄,有明显着生基部,干后软骨质,子实层面近白色,有明显网格褶皱,不育面乳黄色至黄褐色,干后近黑色,有短绒毛,孢子呈腊肠型,无色透明,单生或群生。2.生物学特性菇肚耳菌株YD99栽培营养成分:粗木屑,细木屑,麸皮等,其中,含水量59wt%~60wt%。设置菇肚耳菌株YD99菌丝体培养温度25~28℃,湿度58%~60%,CO2浓度800ppm~1000ppm,培养周期18d~25d。子实体生长温度范围是19~35℃,最适温度是22~25℃。菌丝体耐高温,在母种培养基上42℃放置24h后转接,仍能恢复生长。与现有技术相比,本发明菇肚耳菌株YD99具有子实体肉厚,味道鲜美,口感松脆爽口,生育周期短,具有早熟、抗杂能力强、成活率高等特点,有效改善了皱木耳口感、质地等商品性状,使得该产品在市场上具有独特的竞争性。4.营养成分菇肚耳YD99含有能量1235kj/100g,蛋白质7.21g/100g,总膳食纤维29.3g/100g,总糖58.4%,钠5.26mg/100g,碳水化合物48.4g/100g,水分11%,灰分2.6g/100g,脂肪1.5g/100g,饱和脂肪酸总量(十二碳酸甲酯、十三碳酸甲酯、十四碳酸甲酯、十五碳酸甲酯、十七碳酸甲酯、十八碳酸甲酯、二十碳酸甲酯)0.159g/100g,含有16种氨基酸,分别为:天门冬氨酸0.54g/100g、苏氨酸0.29g/100g、丝氨酸0.29g/100g、谷氨酸0.68g/100g、甘氨酸0.29g/100g、丙氨酸0.4g/100g、缬氨酸0.36g/100g、蛋氨酸0.032g/100g、异亮氨酸0.21g/100g、亮氨酸0.4g/100g、酪氨酸0.16g/100g、苯丙氨酸0.26g/100g、赖氨酸0.28g/100g、组氨酸0.12g/100g、精氨酸0.3g/100g、脯氨酸0.26g/100g。氨基酸总量为4.87g/100g。研究结果显示,菇肚耳YD99的膳食纤维含量较高,对人体内许多营养物质的消化、吸收和代谢起到良好的作用;同时所含氨基酸总含量比皱木耳高,在调节生理功能、催化代谢的过程中发挥重要作用。5.栽培技术母种制作:菇肚耳菌株YD99的母种培养基为PDA培养基:去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000mL,pH=6.5~6.7。将去皮后马铃薯切1cm3见方小块,在沸水中煮15~20min后用6层纱布进行过滤,将滤液再次煮沸加入琼脂并不断搅拌,待琼脂完全溶解后加入葡萄糖,定容至1000mL。装入试管或三角瓶内,胶塞或棉塞封口覆盖铝箔纸。121℃高压条件下灭菌30min。冷却到25℃左右,在超净工作台内接入菇肚耳菌株YD99,然后放入25℃恒温培养箱,暗光培养12天左右,母种即可长好。菇肚耳YD99枝条原种制作:将准备好的枝条分散开泡入加有0.5wt%的石灰水中,待枝条泡至无白芯,将其捞出沥干枝条表面多余的水分,将枝条表面沾满含水量为50wt%的麦麸,每30支枝条为一组装入规格为12cm×20cm的菌袋内,菌袋内空隙用含水量55wt%的麦麸填充,在每组枝条中间插入插棒,作为接种预留口。121℃灭菌60min,灭菌结束待高压灭菌锅压力将为0MPa时,温度降至60℃以下即可出锅。将完成灭菌的枝条放入超净工作台内,待其冷却至25~30℃,在无菌条件下进行接种,接入上面准备好的菇肚耳YD99母种,完成接种的枝条做好标记后,放入25℃恒温培养箱,暗光培养30~35d左右,原种即可长好。菇肚耳YD99的菌包制作:菇肚耳YD99出耳菌包配方为:粗木屑65wt%、细木屑20.30wt%、麦麸12.20wt%、石膏1.65wt%、石灰0.85wt%,含水量59wt%,灭菌前调节pH=7.5~8.0。按配方要求准确称量粗木屑并提前24h进行预湿,准确称量各种原料后细木屑与麦麸进行混匀,豆粉、石灰和石膏进行混匀,两者混匀后再将两者与预湿好的粗木屑混合在一起,加水调节含水量为59wt%,并将所有原料充分混匀。使用卧式装袋机进行装袋处理,保证每个菌包种1.25kg。将菌袋上方多余菌袋窝入料的预留孔内,插入插棒,预留孔以方便接入上面准备好的菇肚耳YD99原种。将制作好的菌包放置于常压灭菌锅内,待锅内温度升至100℃后,保持12h。灭菌完成待锅内温度降至60℃以下进行出锅,将菌包摆进接种箱内,并用二氧化氯药剂进行药熏处理,待药味下降,烟雾散尽即可进行接种操作。菇肚耳YD99的菌包培养:培养室在菌包进入前三天进行消毒处理,并进行环境监测,检测合格后方可放入菌包进行培养。将完成接菌的菌包放置于环境合格的培养室内进行培养,菌包进入培养室的前三天仍进行熏药处理。菌包培养的前7天培养室温度保持在25±1℃,7~15天培养室温度降至23±1℃,菌包培养15天后,温度降至20±1℃。菌包进入培养室7天后,每天早8点和晚6点进行两次通风处理。待菌包完成培养即可进行出耳工作。菇肚耳YD99催芽管理:将培养好的菌包按照编号进行分类处理,每个编号菌包单独处理。使用前对打孔机进行调节,打孔机上安装18排滚轮且各滚轮间距相等,调节打孔深度为5~8mm,调整好的打孔机表面用75%酒精进行消毒,完成调整和消毒后即可对菌包进行打孔处理,每个菌包打孔234~280个,将完成打孔的菌包按编号码好,进行催芽工作。将完成打孔后的菌包上方覆盖塑料薄膜及草帘子,以保证温度及湿度。湿度控制在80~85%,即菌包表面始终保持存在一层薄薄的水汽,当温度低于16℃不能进行浇水工作;催芽期间菌包对氧气的消耗量较小,不需要大通风,只需保证上午十点左右进行通风即可;菇肚耳YD99催芽期间最适的温度为20~26℃,催芽期间避免阳光直射,散射光有助于原基的形成。菇肚耳YD99出耳管理:出耳管理主要包括两个阶段,即原基分化耳片阶段和耳片展片阶段。原基分化耳片阶段空气湿度始终保持85~90%,减少避免干湿交替的次数;温度控制在20~26℃,避免温度超过30℃;原基分化阶段需要高浓度氧气,加大通风,二氧化碳浓度不得高于1000ppm。当原基分化成1cm大小耳片时,停止浇水48h,待耳片完全干后,再次浇水。耳片展开阶段,当温度低于19℃时停止浇水,当温度处于19~25℃之间时,每次浇水3min,每四个小时浇一次,以菇肚耳YD99耳片全部湿透为标准。有益效果:本发明提供的菇肚耳菌株YD99,满足了市场多样性需求,并且该菌株具有商品性好,干耳泡发率高。子实体胶质,品质优、营养好、产量高、商品性佳且市场前景好的特点。附图说明图1为待测菌株DNA琼脂糖凝胶电泳图。图2为菇肚耳菌株YD99的系统发育树。具体实施方式本发明提供一种菇肚耳菌株YD99及其栽培方法,为使本发明的目的、技术方案及效果更加清楚、明确,以下对本发明进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。实施例1菌株“皱木耳01”分离纯化步骤1)自然晾晒采自江西赣州的皱木耳菌株,标本保藏于吉林农业大学食用菌教育部工程研究中心。2)配制培养基PDA培养基:去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000ml,pH=6.6。将去皮后马铃薯切1cm3见方小块,在沸水中煮18min后用6层纱布进行过滤,将滤液再次煮沸加入琼脂并不断搅拌,待琼脂完全溶解后加入葡萄糖,定容至1000ml。装入试管内,胶塞封口覆盖铝箔纸。121℃高压条件下灭菌30min。3)“皱木耳01”菌种分离(组织分离)将PDA斜面试管、无菌培养皿、青霉素、镊子等放入超净工作台中,紫外灭菌30min。紫外灭菌完成后,用75%酒精棉对双手、镊子和待分离耳片进行消毒,减少杂菌的基数。在两个培养皿内各加入10ml的75%酒精及青霉素一支,命名为1号及2号。用镊子将白色变异耳片边缘内卷的部分去掉,在无褶皱的耳片光滑的地方夹取约3mm2的耳片所需数量放入1号培养皿中,放置1min,之后取出放入2号培养皿内,放置1min,用灭菌冷却后的镊子夹取耳片从酒精灯火焰上快速穿梭1s后放入试管内。将分离后的试管放入26℃恒温培养箱内,进行培养。待培养5天,在培养皿内挑取生长整齐的前端菌丝快速转接到另一个PDA斜面培养基或培养皿上进行纯化培养,作为纯菌种,放置于26℃恒温培养箱内进行培养。挑选出菌丝粗壮、浓密、均一,菌丝生长速度快的菌株,将该菌株编号为“皱木耳02”。实施例2菇肚耳菌株“皱木耳02”的分离纯化1)技术路线:营养琼脂培养基制作→液体菌种制作→栽培培养基制作→接种与培养→催芽出耳→挑选菇肚耳YD99菌株。2)营养琼脂培养基制作取蛋白胨10g+葡萄糖10g+氯化钠5g+牛肉膏5g放入大烧杯中;再加水1000ml,待完全溶解后,调节PH(6.8~7.5);分装于小三角瓶(200ml),塞上瓶塞牛皮纸扎好;培养基灭菌保温时间为121℃,15min。3)液体菌种制作用揭盖夹揭开平板盖,用托平板的夹子夹住平板;用接种钩刮掉平板表面皱木耳02的气生菌丝;用接种刀在距离老接种块2cm处上下左右均匀切取4mm大小皱木耳02的菌种块;将平板固定在托平板的夹子中,放到三脚架上灼烧接种钩,放在工具架上冷却;取下铝铂纸,用坩埚钳拔去瓶塞,并将坩埚钳和瓶塞放在工具架上,保持瓶塞无物体接触;用接种钩取4块皱木耳02的菌种,移入摇瓶;盖上瓶塞,封上铝铂纸;在摇瓶上记录母种日期和接种日期,放入摇床25℃,180rmin培养。4)栽培培养基制作木屑培养基:粗木屑65wt%、细木屑20.30wt%、麦麸12.20wt%、石膏1.65wt%、石灰0.85wt%,含水量59wt%,灭菌前调节pH=7.8。按配方要求准确称量粗木屑并提前24h进行预湿,准确称量各种原料后细木屑与麦麸进行混匀,豆粉、石灰和石膏进行混匀,两者混匀后再将两者与预湿好的粗木屑混合在一起,加水调节含水量为59%,并将所有原料充分混匀。使用卧式装袋机进行装袋处理,保证每个菌包种1.25kg。将菌袋上方多余菌袋窝入料的预留孔内,插入插棒,预留孔以方便接种。将制作好的菌包放置于常压灭菌锅内,待锅内温度升至100℃后,保持12h。灭菌完成待锅内温度降至60℃以下进行出锅,将菌包摆进接种箱内,并用二氧化氯药剂进行药熏处理,待药味下降,烟雾散尽即可进行接种操作。5)接种与培养按照无菌操作规程,将液体菌种按每袋25ml接入栽培袋中,将完成接菌的菌包放置于恒温培养箱。菌包培养的前7天培养室温度保持在25℃,10天培养室温度降至23℃,菌包培养15天后,温度降至20℃。菌包进入培养室7天后,每天早8点和晚6点进行两次通风处理。待菌包完成培养即可进行出耳工作。记录早、中、晚培养室内温度及菌丝长满菌袋时间。6)催芽出耳将培养好的菌包按照编号进行分类处理,每个编号菌包单独处理。使用前对打孔机进行调节,打孔机上安装18排滚轮且各滚轮间距相等,调节打孔深度为6mm,调整好的打孔机表面用75%酒精进行消毒,完成调整和消毒后即可对菌包进行打孔处理,每个菌包打孔260个,将完成打孔的菌包按编号码好,进行催芽工作。湿度控制在82%,即菌包表面始终保持存在一层薄薄的水汽,当温度低于16℃不能进行浇水工作;催芽期间菌包对氧气的消耗量较小,不需要大通风,只需保证上午十点左右进行通风即可;催芽期间最适的温度为20~26℃,催芽期间避免阳光直射,散射光有助于原基的形成。记录空间温湿度及各编号菌包原基形成时间。待菌袋表面形成原基后,空气湿度始终保持88%,减少避免干湿交替的次数;温度控制在22℃,避免温度超过30℃,原基分化阶段需要高浓度氧气,加大通风,CO2浓度不得高于1000ppm。当原基分化成1cm大小耳片时,停止浇水48h,待耳片完全干后,再次浇水。耳片展开阶段,耳片展开阶段,当温度低于19℃时停止浇水,当温度处于22℃之间时,每次浇水3min,每四个小时浇一次,以菇肚耳YD99耳片全部湿透为标准。记录早、中、晚空间温度和湿度及各编号菌包耳片展开时间。挑选菇肚耳YD99菌株:通过系统筛选,从3200片皱木耳菌株中,获得一个耳片厚壮,性状圆整,朵型较好的皱木耳标本,该标本及其组织分离纯化的菌株命名为菇肚耳YD99。实施例4生物学特性实验1)生长速度实验用直径7mm的打孔器将活化好的菌种接种于PDA培养基中,置于26℃恒温培养箱内进行培养。设计5次重复,以接种时间为准,每隔24h进行菌丝生长距离的记录,待菌丝长满PDA培养基时结束测量。以PDA培养基为基础培养基,将淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、糊精设为5个碳源处理,以蛋白胨、酵母浸粉、牛肉膏设为3个氮源处理,每个处理设5次重复,记录菌丝生长速度和长势。用直径7mm的打孔器将活化好的菌种接种于PDA平板培养基中,分别置于15℃、20℃、25℃、30℃,pH=5、5.5、6、7、8环境下进行培养。每个处理设置5个重复,记录菌丝生长速度和长势。将实验结果记录下表:表1、生长速度表2、不同碳源对菇肚耳YD99菌株菌丝长势的影响表3、不同氮源对菇肚耳YD99菌株菌丝长势的影响通过表1,表2,表3可以看出,菇肚耳YD99的生长速度为0.625cmd,结合生长速度和菌丝浓度来看,最适碳源为蔗糖,乳糖和糊精次之;最适氮源为酵母浸粉。2)温度和pH对菇肚耳YD99菌丝生长的影响表4、温度对菇肚耳YD99菌丝生长的影响表5PH对菇肚耳YD99菌丝生长的影响最适生长温度为30℃,此时菌丝生长较快,菌丝较为粗壮。菌丝在pH=6内均能生长,最适pH为6,次之为5.5。实施例5菇肚耳YD99的农艺性状实验本实施例将实施例4采收的各个菌株的子实体留样保存,记录干、鲜耳片形态特征(因本实验均采用小孔出耳方式,所以采收的子实体直径均控制在5.0cm,故耳片直径不做记录范围)。耳片褶皱多并形成网格,耳片厚度2mm,百片重量256g,干耳腹面颜色浅红褐色,干耳背面颜色浅红褐色,通过对其整体分析,菇肚耳YD99商品性状最好时表现为单片,小孔出耳特点耳片整齐。实施例6大亚基LSU测定:在本实施例中,LSU测序委托生工生物工程(上海)股份有限公司(以下简称“生工”)进行,包括以下过程:基因组的提取:按照生工真菌基因组DNA抽提试剂盒说明书提取。将所得到的DNA溶液置于-20℃,冷藏备用。PCR扩增及体系建立(25μL):将检测好的DNA使用LROR和LR7为上、下游引物进行种属关系的鉴定,LROR序列为5-ACCCGCTGAACTTAAGC-3’;LR7的序列为5’-TACTACCACCAAGATCT-3’,10×Buffer2.5μl,MgCl22.5μl,dNTP0.6μl,上游引物(pmolL)1μl,下游引物(pmolL)1μl,基因组DNA(μL)5μl,TaqDNAPolymerase5UL0.25μl,ddH2O14.65μl。PCR程序:预变性94℃1min;变性94℃30s;退火50℃1min;延伸72℃90s,34个循环;72℃后延伸10min。本实验菌株皱木耳02的LSU序列测序结果为:gattcccctagtaacggcgagtgaagcgggaagagctcaaatttgaaatctggcggcctcaggtcgtccgagttgtaatctagagaggtgttttccgtgccggaccgtgtacaagtcccttggaacagggcgtcatagagggtgagaatcccgtccatgacacggactcccggtgctctgcgatacaccttcaaagagtcgagttgtttgggaatgcagctcaaaacgggtggtaaattccatctaaagctaaatacaggcgagagaccgatagcgaacaagtaccgtgagggaaagatgaaaagaactttggaaagagagttaaacagtacgtgaaattgttgaaagggaaacgcttgaagtcagtcgcgtctgccaggactcagccttgcttctgcttggtgcacttcttggtggatgggccagcatcgattttggtcgccggaaaagggtgggaggaatgtggcagcttttgctgtgttatagccttctgtcgtacacggtggttgggatcgaggactgcagcacgcctttggtcggggttcgcccacgccacgtgcttaggatgctggcgtaatggctttaaacgacccgtcttgaaacacggaccaaggagtctaacatgcctgcgagtgtttgggtgcaaaacccaggcgcgtaatgaaagtgaaaagttgggactctttagtgaggcaccgacgcccgaccctgaagtcttctgacgggtttgaggcagagcatgtatgttgggacccgaaagatggtgaactatgcctgaatagggtgaagccagaggaaactctggtggaggctcgtagcgattctgacgtgcaaatcgatcgtcaaatttgggtataggggcgaaagactaatcgaaccatctagtagctggttcctgccgaagtttccctcaggatagcagaaactcgcatcagttttatgtggtaaagcgaatgattagaggccttggggttgaaacaaccttaacctattctcaaactttaaatatgtaagatcggaccgtcacttgattggaccgtctggcgaatgagagtttctagtgggccatttttggtaagcagaactggcgatgcgggatgaaccgatcgcgaggttaaggtgccggaatacacgctcatcagacaccacaaaaggtgttagttcatctagacagcaggacggtggccatggaagtcggaatccgctaaggagtgtgtaacaactcacctgccgaatgaactagccctgaaaatggatggcgctcaagcgtgttacccatacctcgccgtcagcgttgaagtgacgcgctgacgagtaggcaggcgtggaggtcag,其序列为1335bp的DNA片段(如附图1所示)。从GenBank中查得,皱木耳02菌株LSU序列与木耳属皱木耳的LSU序列相似性最高。并从GenBank中查得与木耳属皱木耳相近种的ITS序列,应用MEGA软件构建出供试菌株的系统发育树,利用系统发育树鉴定供试菌株种属关系,供试菌株皱木耳02属于皱木耳类群(如附图2所示)。综上所述,本发明提供的一种菇肚耳菌株YD99及其栽培方法,本发明提供的菇肚耳菌株YD99,属于皱木耳(Auriculariadelicate),保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所,保藏编号为CGMCCNO.16099,保藏日期为2018年8月31日。本发明获得了皱木耳菇肚耳菌株YD99,满足了市场多样性需求,并且该菌株具有商品性好,干耳泡发率高。子实体胶质,品质优、营养好、产量高、商品性佳且市场前景好的特点。应当理解的是,本发明的应用不限于上述的举例,对本领域普通技术人员来说,可以根据上述说明加以改进或变换,所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。序列表黑龙江黑臻生物科技有限公司李晓一种菇肚耳菌株YD99及其栽培方法1SIPOSequenceListing1.011335DNA人工序列(rengongxulie)1gattcccctagtaacggcgagtgaagcgggaagagctcaaatttgaaatctggcggcctc60aggtcgtccgagttgtaatctagagaggtgttttccgtgccggaccgtgtacaagtccct120tggaacagggcgtcatagagggtgagaatcccgtccatgacacggactcccggtgctctg180cgatacaccttcaaagagtcgagttgtttgggaatgcagctcaaaacgggtggtaaattc240catctaaagctaaatacaggcgagagaccgatagcgaacaagtaccgtgagggaaagatg300aaaagaactttggaaagagagttaaacagtacgtgaaattgttgaaagggaaacgcttga360agtcagtcgcgtctgccaggactcagccttgcttctgcttggtgcacttcttggtggatg420ggccagcatcgattttggtcgccggaaaagggtgggaggaatgtggcagcttttgctgtg480ttatagccttctgtcgtacacggtggttgggatcgaggactgcagcacgcctttggtcgg540ggttcgcccacgccacgtgcttaggatgctggcgtaatggctttaaacgacccgtcttga600aacacggaccaaggagtctaacatgcctgcgagtgtttgggtgcaaaacccaggcgc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权利要求:1.一种菇肚耳菌株,其特征在于,所述菇肚耳菌株为YD99,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所,保藏编号为CGMCCNO.16099,保藏日期为2018年8月31日,生物学分类命名为皱木耳,拉丁文名称Auriculariadelicata。2.根据权利要求1所述的菇肚耳菌株,其特征在于,包括所述菇肚耳菌株YD99的子实体,所述子实体分子标记的分子量为1335bp,所述分子标记的序列为:gattcccctagtaacggcgagtgaagcgggaagagctcaaatttgaaatctggcggcctcaggtcgtccgagttgtaatctagagaggtgttttccgtgccggaccgtgtacaagtcccttggaacagggcgtcatagagggtgagaatcccgtccatgacacggactcccggtgctctgcgatacaccttcaaagagtcgagttgtttgggaatgcagctcaaaacgggtggtaaattccatctaaagctaaatacaggcgagagaccgatagcgaacaagtaccgtgagggaaagatgaaaagaactttggaaagagagttaaacagtacgtgaaattgttgaaagggaaacgcttgaagtcagtcgcgtctgccaggactcagccttgcttctgcttggtgcacttcttggtggatgggccagcatcgattttggtcgccggaaaagggtgggaggaatgtggcagcttttgctgtgttatagccttctgtcgtacacggtggttgggatcgaggactgcagcacgcctttggtcggggttcgcccacgccacgtgcttaggatgctggcgtaatggctttaaacgacccgtcttgaaacacggaccaaggagtctaacatgcctgcgagtgtttgggtgcaaaacccaggcgcgtaatgaaagtgaaaagttgggactctttagtgaggcaccgacgcccgaccctgaagtcttctgacgggtttgaggcagagcatgtatgttgggacccgaaagatggtgaactatgcctgaatagggtgaagccagaggaaactctggtggaggctcgtagcgattctgacgtgcaaatcgatcgtcaaatttgggtataggggcgaaagactaatcgaaccatctagtagctggttcctgccgaagtttccctcaggatagcagaaactcgcatcagttttatgtggtaaagcgaatgattagaggccttggggttgaaacaaccttaacctattctcaaactttaaatatgtaagatcggaccgtcacttgattggaccgtctggcgaatgagagtttctagtgggccatttttggtaagcagaactggcgatgcgggatgaaccgatcgcgaggttaaggtgccggaatacacgctcatcagacaccacaaaaggtgttagttcatctagacagcaggacggtggccatggaagtcggaatccgctaaggagtgtgtaacaactcacctgccgaatgaactagccctgaaaatggatggcgctcaagcgtgttacccatacctcgccgtcagcgttgaagtgacgcgctgacgagtaggcaggcgtggaggtcag。3.一种权利要求1-2任一项所述的菇肚耳菌株的栽培方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)、菇肚耳菌株YD99的母种制作;(2)、原种制作;(3)、菌包制作;(4)、菌包培养;(5)、催芽管理;(6)、出耳管理。

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