申请/专利权人：新疆金正生物科技有限公司

申请日：2021-08-24

公开（公告）日：2021-10-12

公开（公告）号：CN113493743A

主分类号：C12N1/12(20060101)

分类号：C12N1/12(20060101);C12N13/00(20060101);C12R1/89(20060101)

优先权：

专利状态码：失效-发明专利申请公布后的撤回

法律状态：2022.08.19#发明专利申请公布后的撤回;2021.10.29#实质审查的生效;2021.10.12#公开

摘要：本发明涉及一种沙漠蛋白核小球藻异养‑稀释‑光诱导培养方法。本发明将异养方式与自养方式的结合方式，大大提高沙漠蛋白核小球藻的生物量和蛋白质含量，达到高效生产大量高蛋白质含量的沙漠蛋白核小球藻的目的，不仅可在短时间内获得较高浓度的藻细胞生物量，还可诱导蛋白核小球藻内蛋白质、叶绿素等物质的积累，改善蛋白核小球藻品质，提高蛋白核小球藻的综合利用价值。此外，该方法具有操作简便、实用性强、易实现连续生产等特点，非常有利于大规模的推广和应用，以快速高效地获得大量的高含量蛋白质的沙漠蛋白核小球藻藻粉，为高品质沙漠蛋白核小球藻藻粉的生产提供技术支撑，满足工业生产的需求。

主权项：1.一种沙漠蛋白核小球藻异养-稀释-光诱导培养方法，其特征在于：包括步骤如下：步骤一、藻种活化：从藻种资源库取出平板划线的蛋白核小球藻，在无菌工作台中挑取单个藻株，划线于固体培养基中，置于光照培养箱中培养，培养温度28℃，光照5000lux培养15天，得到活化藻种；步骤二、一级种子液制备：从活化藻种中挑取3-5环藻种，接种到装有50mL培养基的100mL三角瓶中，在温度28℃、光照5000lux，50rmin的振荡培养箱中培养至对数生长期108个mL，得到一级种子液；步骤三、二级种子液制备：将一级种子液以10％vv接种量接种于装有200mL培养基的500mL三角瓶中，在温度28℃、光照5000lux，50rmin的振荡培养箱中培养48～72小时，得到二级种子液；步骤四、三级种子液制备：将二级种子液以10％vv接种量接种于装有500mL培养基的1000mL三角瓶中，在温度28℃、光照5000lux，50rmin的振荡培养箱中培养48～72小时，得到三级种子液；步骤五、异养培养：将三级种子液作为发酵培养的种子液，按照15％的接种量接种于发酵罐中培养，发酵罐培养温度为28℃，溶氧为25％，pH为7，发酵罐转速50rmin，培养72小时后，每天取料2000mL，补充新鲜培养液2000mL，保持半连续培养体系的稳定；步骤六、稀释-光诱导培养：在步骤五的培养过程中，每隔24小时，取样检测发酵液中蛋白核小球藻的细胞干重，初始藻细胞浓度为干重状态2.12-4.24gL，当连续两天检测生物量无显著差异时，停止培养，藻细胞浓度为干重状态150-200gL；将发酵罐中培养液稀释，转入60L柱状光生物反应器中连续培养，培养条件为28℃，光照10000lux，空气通气量为1Lmin，每天取样检测，连续2天检测中，蛋白质含量无显著差异时，培养结束。

全文数据：

权利要求：

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