申请/专利权人：中山大学中山眼科中心

申请日：2022-01-25

公开（公告）日：2022-05-27

公开（公告）号：CN114540302A

主分类号：C12N5/079

分类号：C12N5/079;C12N5/074

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2022.06.14#实质审查的生效;2022.05.27#公开

摘要：本发明涉及一种结合生物基质胶生成hiPSC‑RPE细胞膜片的方法，包括，步骤S1，将预处理后的猪眼葡萄膜制备脱细胞基质胶；步骤S2，维持培养hiPSCs；步骤S3，培养hiPSC‑RPE悬浮球；步骤S4，hiPSC‑RPE细胞扩增培养；步骤S5,生成hiPSC‑RPE细胞膜片；其中，所述步骤S5中，将浓度为1％的Uvea‑Gel包被培养皿，于37℃放置30min左右，待Uvea‑Gel凝固，形成一层薄薄的膜样区域为BM膜，用以模拟天然BM微环境。本发明优化出从猪脉络膜组织分离制备脱细胞基质水凝胶，结合建立的hiPSC诱导3D视网膜分化系统，获得hiPSC‑RPE细胞，建立模拟Bruch膜BM微环境的生成RPE片的方法，为培养GMP级别干细胞提供安全有效的生物材料。

主权项：1.一种结合生物基质胶生成hiPSC-RPE细胞膜片的方法，其特征在于，包括：步骤S1，将预处理后的猪眼葡萄膜制备脱细胞基质胶；步骤S2，维持培养hiPSCs；步骤S3，培养hiPSC-RPE悬浮球；步骤S4，hiPSC-RPE细胞扩增培养；步骤S5,生成hiPSC-RPE细胞膜片；其中，所述步骤S5中，将浓度为1％的Uvea-Gel包被培养皿，于37℃放置30min左右，待Uvea-Gel凝固，形成一层薄薄的膜样区域为BM膜，用以模拟天然BM微环境。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中山大学中山眼科中心 结合生物基质胶生成hiPSC-RPE细胞膜片的方法

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