申请/专利权人:佛山科学技术学院
申请日:2021-02-07
公开(公告)日:2023-02-28
公开(公告)号:CN112812180B
主分类号:C07K16/18
分类号:C07K16/18;A61K39/395;A61P35/00
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2023.02.28#授权;2021.06.04#实质审查的生效;2021.05.18#公开
摘要:本发明属于生物工程技术领域,公开了一种BAX纳米抗体库及其制备方法与应用。其制备方法包括以下步骤:1使用BAX抗原对羊驼进行免疫后,收集外周血液,分离得到淋巴细胞;2提取淋巴细胞的总RNA,反转录扩增cDNA,再经过巢式PCR对cDNA进行扩增,得到目的基因VHH;3将目的基因VHH与载体连接,并转化至感受态细胞,构建VHH基因文库;4从VHH基因文库中取活细胞进行接种培养,采用噬菌体进行培养,纯化噬菌体,得到噬菌体展示文库;5对噬菌体展示文库进行筛选,得到BAX纳米抗体库。所述BAX纳米抗体具有抑制肿瘤细胞生长的作用,可用于制备肿瘤细胞抑制剂或抗肿瘤药物。
主权项:1.一种BAX纳米抗体,其特征在于,所述BAX纳米抗体的序列选自如SEQIDNO:3、SEQIDNO:5-17、SEQIDNO:19-24所示的其中一种;所述BAX纳米抗体的制备方法包括以下步骤:(1)将BAX抗原蛋白通过皮下注射的方式,对羊驼进行4次免疫,免疫间隔为14天,免疫剂量分别为2mg、1mg、0.5mg、0.5mg;再收集羊驼外周血液,分离得到淋巴细胞;(2)提取所述淋巴细胞的总RNA,反转录扩增cDNA,再经过巢式PCR对cDNA进行扩增,得到目的基因VHH;(3)将所述目的基因VHH与载体连接,并转化至感受态细胞,构建VHH基因文库;(4)从所述VHH基因文库中取活细胞进行接种培养,采用噬菌体进行培养,纯化噬菌体,得到噬菌体展示文库;(5)对所述噬菌体展示文库进行筛选,得到阳性克隆,可制得所述BAX纳米抗体。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 佛山科学技术学院 一种BAX纳米抗体库及其制备方法与应用
免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息,力求客观、公正,但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解,仅供参考使用,不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。