申请/专利权人：湖北省农业科学院中药材研究所

申请日：2020-10-16

公开（公告）日：2023-03-14

公开（公告）号：CN112195262B

主分类号：C12Q1/6895

分类号：C12Q1/6895;C12Q1/6858

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.03.14#授权;2021.01.26#实质审查的生效;2021.01.08#公开

摘要：本发明提供了一种湖北贝母ISSR‑PCR扩增反应体系，每20μL反应体系中含有2×TaqMasterMix10.5μL，模板DNA0.8μL，引物2.2μL；将上述反应混合液按如下程序进行扩增：94℃预变性5min，然后94℃变性0.75min，50～60.0℃退火0.75min，延伸1.5min，共40个循环，最后72℃延伸10min，4℃保存。另外，本发明还提供了湖北贝母ISSR‑PCR分子标记方法。该发明所建立的湖北贝母ISSR‑PCR扩增反应体系扩增出的条带清晰度和稳定性高，具有很高的多态性的特点，弥补了现有对湖北贝母遗传多样性研究的不足；而且该湖北贝母ISSR‑PCR分子标记方法操作简单，节约时间和成本，结果稳定可靠，发明的成果对湖北贝母遗传多样性分析、种质资源鉴定及分子育种等方面有较好的应用价值。

主权项：1.一种湖北贝母ISSR-PCR扩增反应体系，其特征在于，每20μL反应体系中含有2×TaqMasterMix10.5μL，模板DNA0.8μL，引物2.2μL；将上述反应混合液按如下程序进行扩增：94℃预变性5min，然后94℃变性0.75min，50～60.0℃退火0.75min，延伸1.5min，共40个循环，最后72℃延伸10min，4℃保存；所述引物为下述引物中任意一条，引物序列5’-3’UBC848CACACACACACACACARG；UBC850GTGTGTGTGTGTGTGTYC；UBC853TCTCTCTCTCTCTCTCRT；UBC857ACACACACACACACACYG；UBC859TGTGTGTGTGTGTGTGRC；UBC866CTCCTCCTCCTCCTC；UBC873GACAGACAGACAGACA；所述退火温度根据所选择的引物来确定，具体如下：引物退火温度UBC84859.3℃；UBC85058.2℃；UBC85356.9℃；UBC85754.3℃；UBC85959.3℃；UBC86660.0℃；UBC87352.0℃。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 湖北省农业科学院中药材研究所 一种湖北贝母ISSR-PCR扩增反应体系及ISSR-PCR分子标记方法和应用

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