申请/专利权人：扬州大学

申请日：2021-08-16

公开（公告）日：2023-04-04

公开（公告）号：CN113717943B

主分类号：C12N5/10

分类号：C12N5/10;C12N15/113;C12N15/867;C12Q1/02;C12R1/91

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.04.04#授权;2021.12.17#实质审查的生效;2021.11.30#公开

摘要：本发明属于分子生物学领域，涉及STIRF3IRF7KO细胞系及其构建方法和应用，本发明针对猪源IRF3、IRF7基因序列的外显子设计特异性sgRNA，插入载体lentiCRISPRv2上，得到慢病毒载体lentiCRISPRv2‑IRF3和lentiCRISPRv2‑IRF7。将重组质粒转染HEK293T细胞后，收集慢病毒感染ST细胞。通过抗生素筛选出成功被感染的细胞，并进行测序、WesternBlot验证。本发明所述的STIRF3IRF7KO细胞系可运用于猪源病毒的基础和应用研究，也为病毒疫苗生产中细胞系的选用提供了有价值的新材料。

主权项：1.一株STIRF3IRF7KO细胞系，其特征在于，分类命名为猪睾丸上皮细胞系STIRF3IRF7KO，保藏编号为CCTCCNO:C2021178；所述细胞系为针对猪源IRF3、IRF7基因序列的外显子设计特异性sgRNA，插入载体lentiCRISPRv2上，得到慢病毒表达载体lentiCRISPRv2-IRF3和lentiCRISPRv2-IRF7，病毒表达载体共同转染HEK293T细胞；将慢病毒加入靶细胞中，接毒后，添加嘌呤霉素或潮霉素B，筛选得到目的细胞系STIRF3IRF7KO；IRF3突变基因的序列如SEQIDNO.5所示；IRF7突变基因的序列如SEQIDNO.6所示；sgRNA引物序列如下：

全文数据：

权利要求：

百度查询： 扬州大学 ST IRF3/IRF7 KO细胞系及其构建方法和应用

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