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【发明公布】一种乳腺癌原发灶对远处转移灶的调控机制研究方法_四川大学华西医院_202310121364.4 

申请/专利权人:四川大学华西医院

申请日:2023-02-16

公开(公告)日:2023-05-02

公开(公告)号:CN116042835A

主分类号:C12Q1/6886

分类号:C12Q1/6886;C12N15/867;C12N15/53;A01K67/027

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2023.05.19#实质审查的生效;2023.05.02#公开

摘要:一种乳腺癌原发灶对远处转移灶的调控机制研究方法,将miRNA‑210干预慢病毒转染乳腺癌细胞,检测Bcl‑2蛋白表达情况变化,构建包含miRNA‑210结合位点的Bcl‑2基因荧光素酶报告基因质粒载体,转染乳腺癌细胞后进行荧光素酶报告基因检测实验,判断二者调控关系;构建裸鼠荷瘤动物模型,向瘤体中心注射原发灶组织外泌体,记录瘤体体积变化,取肿瘤块检测肿瘤细胞自噬情况以及细胞增殖情况;以荧光素酶报告基因检测实验判断原发灶组织外泌体miRNA‑210在体内环境中对乳腺癌细胞增殖的影响,及此影响是否与被调控的目的细胞自噬有关。本发明为临床通过调控自噬防治乳腺癌远处转移提供客观依据。

主权项:1.一种乳腺癌原发灶对远处转移灶的调控机制研究方法,其特征在于,包括:构建乳腺癌远处转移动物模型,构建成功后提取乳腺癌原发灶组织外泌体,检测比较原发灶组织外泌体中携带miRNAs信号表达差异,筛选出靶分子miRNA-210;将miRNA-210干预慢病毒转染乳腺癌细胞,检测Bcl-2蛋白表达情况变化,构建包含miRNA-210结合位点的Bcl-2基因荧光素酶报告基因质粒载体,转染乳腺癌细胞后进行荧光素酶报告基因检测实验,判断miRNA-210和Bcl-2基因的直接调控关系;构建裸鼠荷瘤动物模型,向瘤体中心注射不同预处理来源的乳腺癌远处转移动物模型得到的原发灶组织外泌体,记录瘤体体积变化,取肿瘤块检测肿瘤细胞自噬情况以及细胞增殖情况;以荧光素酶报告基因检测实验判断原发灶组织外泌体miRNA-210在体内环境中对乳腺癌细胞增殖的影响,及此影响是否与被调控的目的细胞自噬有关。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 四川大学华西医院 一种乳腺癌原发灶对远处转移灶的调控机制研究方法

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