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【发明授权】橙黄玉凤花的组织培养方法_惠州市林业科学研究所(惠州植物园管理服务中心)_202011611025.7 

申请/专利权人:惠州市林业科学研究所(惠州植物园管理服务中心)

申请日:2020-12-30

公开(公告)日:2023-05-02

公开(公告)号:CN112640782B

主分类号:A01H4/00

分类号:A01H4/00

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2023.05.02#授权;2021.04.30#实质审查的生效;2021.04.13#公开

摘要:本申请提供一种橙黄玉凤花的组织培养方法。上述的橙黄玉凤花的组织培养方法包括如下步骤:获取橙黄玉凤花的外植体;对外植体进行消毒处理;对消毒处理后的外植体进行刮皮处理;对刮皮处理后的外植体进行接种培养操作,得到外植体丛生芽;对外植体丛生芽进行增殖生根培育操作,得到无菌瓶苗;对无菌瓶苗进行驯化栽培操作,获得橙黄玉凤花。上述的橙黄玉凤花的组织培养方法提高了橙黄玉凤花的增殖效率以及确保了橙黄玉凤花的种群数量稳定性。

主权项:1.一种橙黄玉凤花的组织培养方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)外植体消毒首先用手术剪剪去橙黄玉凤花的地上部分,在流水下使用毛刷仔细清洗干净根茎表层土壤与杂质,然后在流水下冲洗4h,之后放入超声波清洗机中用0.2%WV灭菌净清洗30min,最后用无菌水冲洗5次备用;在超净工作台上用体积百分浓度为75%的酒精消毒30s后,再用0.1%WV的升汞消毒5min,之后用无菌水冲洗5次,用无菌滤纸吸干备用;(2)种苗繁育将(1)中处理的根茎用灭菌后的手术刀切去外表皮,之后将除去外表皮的根茎切成长0.5cm,宽0.5cm,厚0.2cm的正方形薄片接种至诱导培养基中培养,培养24d产生原球茎,35d长出外植体丛生芽;将外植体丛生芽转接至增殖培养基中培养,培养36d后产生大量外植体丛生芽,增殖系数10.2;将外植体丛生芽转接至生根培养基中培养,培养55d后获得大量生长健壮且有2片小叶,高度为3cm-5cm的幼苗,即无菌瓶苗;培养条件为:培养温度25℃,光照光强2000Lux,光照时间14h•d-1,暗培养10h•d-1;其中,所述诱导培养基的组分为12MS、6-BA0.5mgL、NAA0.1mgL、AC0.2%、30gL-1蔗糖和5.0gL-1琼脂;所述增殖培养基的组分为12MS、NAA0.1mgL、ZT0.5mgL、AC0.2%、30gL-1蔗糖和5.0gL-1琼脂;所述生根培养基的组分为12MS、6-BA0.5mgL、NAA0.1mgL、AC0.2%、30gL-1蔗糖和5.0gL-1琼脂;(3)种苗的移栽驯化待无菌瓶苗长至4cm-6cm高,基部长出2个根茎,顶端长出2片小叶,选择健壮的瓶苗,打开瓶盖放置5d-7d,用勺子轻轻的取出无菌瓶苗,放入清水中洗净无菌瓶苗根部的培养基;将洗净的无菌瓶苗移栽至装有基质的育苗盘中,在温室大棚进行驯化栽培,温室大棚空气湿度控制在60%,散射光强度控制在1000Lux;其中,所述基质为体积比1:1:1的腐殖质、沙子和珍珠岩;移栽成活率97.6%;(4)回归生境选择与栽植选择在温室大棚驯化栽培2年后的回归苗,于原生境相似或邻近的林分环境,林分郁闭度0.4-0.8,排水良好,通风良好,沙壤土的林下坡地进行野外栽培定植;栽植前,首先清除杂灌、草、残渣、石块和树根,按15cm×20cm株行距进行栽植,起穴,将驯化苗连同原驯化栽培基质同时放入穴中,避免伤根;每隔20d定期到野外回归栽植点进行查看,对受病虫侵害的植株及时清理,被雨水冲出球茎的幼苗及时培土;其中,回归苗的具体规格为苗高大于或等于6cm,叶片数大于或等于4片,球茎的数目为2个。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 惠州市林业科学研究所(惠州植物园管理服务中心) 橙黄玉凤花的组织培养方法

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