申请/专利权人:河北省农林科学院经济作物研究所
申请日:2020-07-15
公开(公告)日:2023-05-16
公开(公告)号:CN111778348B
主分类号:C12Q1/6895
分类号:C12Q1/6895;C12Q1/6872;C12N15/11
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2023.05.16#授权;2020.11.03#实质审查的生效;2020.10.16#公开
摘要:本发明涉及分子遗传技术领域,特别是指一种与甜椒核雄性不育相关的飞行质谱分子标记Cap91及其应用。包括提取甜椒核雄性不育两用系冀研16号幼苗DNA;以步骤A中的甜椒核雄性不育两用系冀研16号幼苗DNA为模板,以特定的质谱引物PCR扩增,用SAP酶消化反应去除PCR反应体系中剩余的dNTPs和引物,样品单碱基延伸、脱盐后进行质谱检测分型;当甜椒5号染色体上第28594037个核苷酸为A、C,AC时,所述的甜椒不育、纯合可育、杂合可育等工艺步骤。本发明解决了现有技术中存在的测交的工作量大等问题,具有避免了转育过程中发生大量测配的问题,提高了转育效率等优点。
主权项:1.利用飞行质谱分子标记Cap91鉴别甜椒核雄性不育的方法,其特征在于包括以下步骤:A、提取甜椒冀研16号自交获得的F2代幼苗DNA;B、以步骤A中的甜椒冀研16号自交获得的F2代幼苗DNA为模板,以质谱引物进行PCR扩增,用SAP酶消化反应去除PCR反应体系中剩余的dNTPs和引物,样品单碱基延伸、脱盐后进行质谱检测分型,所述的质谱引物组合包括:Cap91-R:ACGTTGGATGACCTTTTTCGTCTTCTGTTG,如SEQIDNO.1所示;Cap91-F:ACGTTGGATGAGATGCATTTTCCGTGCTGG,如SEQIDNO.2所示;C、根据步骤B的分型结果,所述的甜椒5号染色体上第28594037个核苷酸的碱基为序列SEQIDNO.3中第937bp位点,当甜椒5号染色体上第28594037个核苷酸为A,所述的甜椒不育;当甜椒5号染色体上第28594037个核苷酸为C,所述的甜椒纯合可育。
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权利要求:
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