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【发明授权】一种杆状病毒载体及其在昆虫细胞中制备rAAV的应用_睿征医药科技(武汉)有限公司_202210528997.2 

申请/专利权人:睿征医药科技(武汉)有限公司

申请日:2022-05-16

公开(公告)日:2023-06-27

公开(公告)号:CN114736928B

主分类号:C12N15/866

分类号:C12N15/866;C12N7/00;C12N5/10;C12N15/34;C12R1/93

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2023.06.27#授权;2022.07.29#实质审查的生效;2022.07.12#公开

摘要:本发明属于基因工程技术领域,具体公开了一种杆状病毒载体及其在昆虫细胞中制备rAAV的应用,该杆状病毒载体包含外源基因表达盒与稳定序列,所述稳定序列位于距离所述外源基因表达盒的5kb以内,所述稳定序列为CNE序列或NAE序列。本发明将CNE或NAE序列构建至重组杆状病毒载体上的外源基因表达盒附近,使得携带产生AAV所必需的功能蛋白表达盒或ITR核心表达元件等外源基因表达盒的重组杆状病毒感染昆虫细胞,在连续传代多代后,重组杆状病毒和rAAV的生产水平仍能保持相对稳定。

主权项:1.一种用于制备重组杆状病毒的杆状病毒穿梭载体,其特征在于:包含外源基因表达盒与稳定序列,所述稳定序列位于距离所述外源基因表达盒的5kb以内,所述稳定序列为CNE序列或NAE序列;所述外源基因表达盒为AAV的cap基因表达盒、AAV的rep基因表达盒和带有异源功能基因的AAVITR核心表达元件中的至少一个;所述稳定序列位于距离所述cap基因表达盒的起始端和末端、所述rep基因表达盒起始端和末端以及所述带有异源功能基因的AAVITR核心表达元件的一端和另一端中的至少一处的5kb以内;利用该杆状病毒穿梭载体感染昆虫细胞,在连续传代中,保证了重组杆状病毒的传代稳定性。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 睿征医药科技(武汉)有限公司 一种杆状病毒载体及其在昆虫细胞中制备rAAV的应用

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