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【发明公布】一种根癌农杆菌介导的笃斯越橘转基因体系的建立方法_浙江农林大学_202310457255.X 

申请/专利权人:浙江农林大学

申请日:2023-04-26

公开(公告)日:2023-07-28

公开(公告)号:CN116497059A

主分类号:C12N15/84

分类号:C12N15/84;A01H5/00;A01H6/36

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2023.08.15#实质审查的生效;2023.07.28#公开

摘要:本发明公开了一种笃斯越橘转基因体系的建立方法,该方法包括:以笃斯越橘无菌幼嫩茎叶为外植体,接种到预培养基中培养10‑14d;得到生长状况良好的愈伤组织后,以此为侵染材料进行侵染,农杆菌侵染后共培养8天,经过潮霉素筛选后培养40‑60d后出现火龙果红色愈伤组织,出现转基因愈伤组织后,调整IBA与Cppu的激素比例,加速出芽,转基因不定芽长到2‑3cm,移到生根培养基上诱导生根。本发明针对笃斯越橘,转化率达4.65%,为笃斯越橘的转基因繁殖提供了技术支持。

主权项:1.一种根癌农杆菌介导的笃斯越橘转基因体系的建立方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)在特定侵染液辅助下通过根癌农杆菌传递质粒到笃斯越橘中完成转基因;(2)用于农杆菌转基因的植物材料是笃斯越橘的愈伤组织,由笃斯越橘叶片和茎段经剪切和预培养得到;(3)农杆菌侵染外植体过程包含农杆菌与外植体在侵染液中、超声刺激、摇床培养抚育、外植体脱离菌液、外植体在共培养培养基上进行培养、共培养结束后细菌等过程;(4)外植体在筛选培养基中进行筛选培养,转基因材料愈伤组织长大,通过芽诱导培养基诱导生芽,芽长大;(5)通过生根培养基诱导生根。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 浙江农林大学 一种根癌农杆菌介导的笃斯越橘转基因体系的建立方法

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