申请/专利权人：云南省农业科学院农业环境资源研究所;中国农业科学院农业资源与农业区划研究所

申请日：2022-06-24

公开（公告）日：2023-08-15

公开（公告）号：CN115125284B

主分类号：C12Q1/04

分类号：C12Q1/04;C12R1/77

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.08.15#授权;2022.10.25#实质审查的生效;2022.09.30#公开

摘要：本发明涉及一种光叶苕子拮抗菌的高效筛选方法，属于菌株筛选技术领域。本发明的筛选方法包括如下步骤：1将光叶苕子样品液涂布于固体培养基中，培养，得到菌落；2将步骤1所述的菌落接种至已含有靶标微生物的固体培养基中，继续培养，筛选靶标微生物生长受抑制区域的菌落，得到拮抗菌。本发明的筛选方法无需事先分离单菌落，节约时间，简单高效；不易遗漏样品中的微生物；能定量把控靶标微生物的含量；还能使靶标微生物在培养基中均匀接种，避免了靶标微生物喷洒不均匀影响拮抗菌的筛选，也避免了靶标微生物泄漏导致的二次污染。为筛选植物拮抗菌提供了依据。

主权项：1.一种光叶苕子拮抗菌的高效筛选方法在筛选香蕉枯萎病TR4拮抗菌中的应用，其特征在于，包括如下步骤：1将光叶苕子内生菌样品液涂布于固体培养基中，培养，得到细菌和真菌菌落；2将步骤1所述的细菌和真菌菌落分别接种至已含有香蕉枯萎病TR4的固体培养基中，继续培养，筛选香蕉枯萎病TR4生长受抑制区域的菌落，得到拮抗菌；步骤1从所述光叶苕子内生菌样品液中分离细菌的方法为：将10g光叶苕子根剪碎，加入75%酒精消毒60s后清洗，与9mL无菌水混合研磨后，静置15min分离，取上清液进行梯度稀释，得到光叶苕子内生菌样品液，取0.1mL光叶苕子内生菌样品液涂布于NA培养基平板上，于30℃倒置培养48h，得到光叶苕子内生细菌菌落；步骤1从所述光叶苕子内生菌样品液中分离真菌的方法为：将10g光叶苕子根剪碎，加入75%酒精消毒60s后清洗，再加入1%氯化汞消毒20s后清洗，与9mL无菌水混合研磨后，静置15min分离，取上清液进行梯度稀释，得到光叶苕子内生菌样品液，取0.1mL光叶苕子内生菌样品液涂布于PDA培养基平板上，于28℃倒置培养72h，得到光叶苕子内生真菌菌落；步骤2所述接种的方法为复印接种法；所述复印接种法为：利用绒布或滤纸进行菌落转接。

全文数据：

权利要求：

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