申请/专利权人：武汉市华甜生物科技有限公司

申请日：2020-05-12

公开（公告）日：2023-09-05

公开（公告）号：CN111574607B

主分类号：C07K14/43

分类号：C07K14/43;C12P21/02;C07K1/16;C12R1/125;C12R1/685

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.09.05#授权;2020.09.18#实质审查的生效;2020.08.25#公开

摘要：本发明公开了一种基于微生物发酵从非洲竹芋中提取索马甜的方法。由于竹芋果实中索马甜蛋白与纤维素等多糖交联在一起严重影响索马甜的提取效果，本发明利用黑曲霉和枯草芽孢杆菌在适宜的发酵环境下能合成降解纤维素和多糖的纤维素酶和淀粉酶来解除多糖类物质对索马甜提取的影响，而且本发明竹芋的核与果肉中含有的索马甜同时被提取。因此，提取步骤少，提取成本低，环境污染小，索马甜的甜度损失率能控制在16%‑28%。同时还提高了提取产量，相比于传统单纯果肉中索马甜的提取，索马甜的产量增加了22%‑31%。

主权项：1.一种基于微生物发酵从非洲竹芋中提取索马甜的方法，其特征在于，包括以下步骤：1将竹芋洗净，切分，加冰，所述加冰质量为非洲竹芋鲜果质量的1-2倍，加0.6-0.8％的甘油水溶液，加0.6-0.8％的甘油水溶液质量为非洲竹芋鲜果质量的2-3倍，果肉和核一起打浆；2在浆液中同时接种黑曲霉ATCC16404、ATCC6275和枯草芽孢杆菌ATCC6051、ATCC9327，发酵温度28-35℃，发酵15-18小时；3离心去除微生物及杂质；4调节上清液的pH至11-12，离心得到索马甜粗品；5用5-6℃的0.5％的甘油水溶液溶解索马甜粗品，然后用葡聚糖凝胶SephadexG50过滤得到索马甜溶液；6调节步骤5获得的索马甜溶液的pH至11-12，温度降至1-2℃，离心获得索马甜样品；7索马甜保存于0.5％的甘油溶液中；所述步骤2中，黑曲霉ATCC16404和ATCC6275的种子培养基组分为0.1-0.2％碳酸钙，0.05-0.1％氯化镁，0.05-0.1％氯化亚铁，0.1-0.3％氯化钠，0.2-0.3％牛肉膏，0.1-0.2％蛋白胨，0.1-0.2％酵母粉，2-3％果糖，甘油1-2％，培养温度30-32℃；枯草芽孢杆菌ATCC6051和ATCC9327的种子培养基组分为0.3-0.5％牛肉膏，0.5-0.7％蛋白胨，0.3-0.6％酵母粉，甘油0.5-1％，0.2-0.3％碳酸钙，0.1-0.15％氯化镁，0.5-0.8％氯化钠；黑曲霉ATCC16404和ATCC6275的接种量分别为3-5％和2-3％；枯草芽孢杆菌ATCC6051和ATCC9327的接种量分别为1-2％和2-3％。

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权利要求：

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