申请/专利权人：厦门元之道生物科技有限公司

申请日：2022-03-02

公开（公告）日：2023-09-15

公开（公告）号：CN114410724B

主分类号：C12P21/06

分类号：C12P21/06;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;C07K1/14;A23L33/18

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.09.15#授权;2022.05.20#实质审查的生效;2022.04.29#公开

摘要：本发明涉及牡丹花加工领域，特别涉及一种具有抑制酪氨酸酶活性的丹凤牡丹花肽及其制备方法和应用。其中，具有抑制酪氨酸酶活性的丹凤牡丹花肽的制备方法为先将干制的丹凤牡丹花与水混合经研磨均质处理形成浆液；所述浆液依次经复合酶水解、灭酶、沉淀和离心过滤得到丹凤牡丹花肽原液；所述丹凤牡丹花肽原液经膜过滤截留分子量为1000～10000Da的多肽滤液并浓缩即得所述丹凤牡丹花肽；所述复合酶由酸性蛋白酶、果胶酶及纤维素酶组成。该方法采用由酸性蛋白酶、果胶酶及纤维素酶组成的复合酶对丹凤牡丹花浆液作进行一步水解，其得到的丹凤牡丹花肽不仅具有高抑制酪氨酸酶活性，而且无苦味，口感好，有利于其在食品中的应用。

主权项：1.一种具有抑制酪氨酸酶活性的丹凤牡丹花肽的制备方法，其特征在于：先将干制的丹凤牡丹花与水混合经研磨均质处理形成浆液；所述浆液在经复合酶水解之前还通过酸化剂调节pH至3.5，所述酸化剂为10%硫酸和10%柠檬酸；所述浆液依次经复合酶水解、灭酶、沉淀和离心过滤得到丹凤牡丹花肽原液；复合酶水解过程中，所述复合酶由537酸性蛋白酶、果胶酶及纤维素酶组成；所述复合酶水解的条件为在55℃下水解4h；其中，按浆液中的蛋白质量加入8000ug的酸性蛋白酶，干制的丹凤牡丹花与果胶酶、纤维素酶的比例为1kg:3g:3g;沉淀和离心过滤过程中，将经灭酶后的水解液加入氢氧化钙粉末调节pH至6.5，以使酶解液中硫酸根、柠檬酸根与钙离子络合生成钙沉淀，让分散型的不溶物富集絮凝沉淀；再通过离心分离以分离出固体渣和酶解清液，所述酶解清液即为丹凤牡丹花肽原液；所述丹凤牡丹花肽原液进行吸附脱色脱味处理：先向丹凤牡丹花肽原液中加入活性炭进行脱色脱味，之后向板框均匀填充白色和红色硅藻土；再将经过吸附脱色脱味的丹凤牡丹花肽原液输送至板框过滤机中脱除活性炭；所述吸附脱色脱味后的丹凤牡丹花肽原液经膜过滤截留分子量为1000～10000Da的多肽滤液：利用陶瓷膜20nm，过滤粗蛋白及多糖，再经过10000Da和1000Da的卷式膜过滤分离，过滤过程添加纯水以脱除氨基酸和寡糖，即得多肽滤液；所述多肽滤液经浓缩得所述丹凤牡丹花肽。

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