申请/专利权人：智享生物(苏州)有限公司

申请日：2023-07-13

公开（公告）日：2023-10-17

公开（公告）号：CN116590371B

主分类号：C12P21/08

分类号：C12P21/08;C12N5/10

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.10.17#授权;2023.09.01#实质审查的生效;2023.08.15#公开

摘要：本发明公开了一种降低中华仓鼠卵巢细胞中抗体高甘露糖型的细胞培养方法，属于生物制药领域。本发明提供的调节抗体高甘露糖型的方法，选用浓缩补料培养工艺，结合培养过程中在降温后调节pH的控制策略，并添加糖型调节剂N‑乙酰葡萄糖胺、Mn2+、尿嘧啶、半乳糖，显著降低高甘露糖型占比。本发明的方法适用于抗体蛋白发酵工艺，具有较强的稳健性，蛋白产量相比于传统的流加培养具有明显提升，且蛋白质量较优。本发明的方法未引入难去除的添加剂，减少了后期的杂质去除工作和杂质检测工作，适合工业化应用。

主权项：1.一种降低抗体甘露糖型水平并提高蛋白产量的方法，其特征在于，采用浓缩补料灌流培养工艺培养表达抗体的细胞，并在基础培养基和用于灌流的培养基中加入糖型调节剂；所述细胞为CHO、CHOK1或CHO-S细胞系；所述糖型调节剂为N-乙酰葡萄糖胺、Mn2+、尿嘧啶和半乳糖的组合；所述N-乙酰葡萄糖胺的浓度为5~15mM，所述Mn2+的浓度为1~4μM，所述尿嘧啶的浓度为1~4mM，所述半乳糖的浓度为5~20mM；所述浓缩补料灌流培养工艺具体是：控制初始接种密度为8×105~1.2×106cellsml，控制初始pH为6.6~7.2，第1~3天培养温度36.0℃~37.0℃，第四天降温至30.5℃~31.5℃,并控制pH为6.75~6.85；控制第1~3天灌流速率为0.405VVD，第4~6天灌流速率为0.805VVD，第8~14天灌流速率为1.005VVD；灌流速率的操作范围为设定值±5%；所述基础培养基是含谷氨酰胺的EdenB600S培养基。

全文数据：

权利要求：

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