申请/专利权人：上海交通大学;上海爱发投资管理有限公司

申请日：2022-11-23

公开（公告）日：2023-10-31

公开（公告）号：CN115725004B

主分类号：C08B37/00

分类号：C08B37/00;A61P35/00

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.10.31#授权;2023.03.21#实质审查的生效;2023.03.03#公开

摘要：本发明公开了一种青稞嫩叶酶提多糖的制备方法及其应用；本发明所述的青稞嫩叶酶提多糖的制备方法可以得到高纯度的酶提多糖，酶提多糖的提取率可达7.68％，纯度可达99.75％。本发明研究发现所述的青稞嫩叶酶提多糖具有良好的抗癌活性，可以显著抑制乳腺癌细胞和结直肠癌细胞增殖。尤其能够特异性地抑制结直肠癌细胞的增殖，且不影响正常结肠粘膜上皮细胞的增殖，具有生物相容性好、特异性强、毒副作用低等特点，能够弥补传统癌症治疗手段的不足，具有广阔的应用前景。

主权项：1.一种青稞嫩叶酶提多糖活性成分在制备抑制结直肠癌细胞Caco-2或CT26的增殖活性药物中的应用，其特征在于，所述青稞嫩叶酶提多糖活性成分的制备方法包括如下步骤：S1、将青稞叶真空冷冻干燥、打粉后收集获得青稞嫩叶粉；S2、将青稞嫩叶粉进行脱脂、酶提、醇沉以及干燥得到青稞酶提粗多糖；所述酶提过程为将青稞嫩叶粉和水1:20-1:30的重量比投加水，向上述溶液中加入5-10μLg青稞粉的耐高温α-淀粉酶，80-90℃水浴1-2h；水浴温度调至60-80℃，加入5-10μLg青稞粉的木瓜蛋白酶，水浴1-2h；100℃水浴灭酶10-20min，冷却后加入40-50μLg青稞粉的糖化酶，60-80℃水浴1-2h；100℃水浴灭酶10-20min，冷却后60-90℃水浴2-4h，得到酶解液；所得酶解液用NaOH溶液调节pH至5-6，加入600-1000Ug青稞嫩叶粉的木聚糖酶和200-600Ug青稞嫩叶粉的纤维素酶，40-60℃保温2-3h后100℃水浴灭酶10-20min，将酶解所得上清液于60-80℃下水浴浓缩至50mL-100mL，冷却后加入3-5倍体积的乙醇，静置，离心，收集沉淀；用水复溶，真空冷冻干燥，获得青稞嫩叶酶提粗多糖；S3、将青稞酶提粗多糖先用纤维素柱进行分离后再经葡聚糖凝胶柱纯化处理即得青稞嫩叶酶提多糖活性成分；所述纤维素柱为DEAE-32纤维素离子交换柱；所述葡聚糖凝胶柱为Sephacryl-400葡聚糖凝胶柱；分离用洗脱液为蒸馏水，洗脱速率为0.5-0.7mLmin，洗脱时间为500-1000min；纯化用洗脱液为蒸馏水，洗脱速率为0.5-0.7mLmin，洗脱时间为500-1000min。

全文数据：

权利要求：

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