申请/专利权人：浙江大学

申请日：2023-08-16

公开（公告）日：2023-11-10

公开（公告）号：CN117025739A

主分类号：C12Q1/686

分类号：C12Q1/686;C12Q1/6888;C12N15/11

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2023.12.05#实质审查的生效;2023.11.10#公开

摘要：本发明公开了一种用寄生螨间接检测四纹豆象和菜豆象的分子方法。通过采用基于这两种豆象线粒体细胞色素氧化酶b基因Cytb基因的特异性引物，可从豆象体表寄生的螨中扩增出目标豆象特定大小的DNA片段。采用此引物，以供测豆粒过筛得到的螨膨腹体DNA为模板进行PCR扩增，对扩增产物作琼脂糖凝胶电泳检测后，即可判断供测豆粒中是否存在目标豆象及其种类。本发明方法在螨膨腹体离开寄主体表10天内均可成功检测出寄主的种类信息，具有实用性强、准确度高、操作容易等优点。尤其在检疫场景中，当筛落物中未见或仅有少量豆象残体组织但可见到螨膨腹体的情况下，本方法可作为豆象过筛检测技术的补充，有效检出并鉴定样品中隐匿豆象的具体种类。

主权项：1.一种用寄生螨间接检测四纹豆象和菜豆象的分子方法，操作如下：1利用过筛法分离得到待检测样品中的寄生螨膨腹体；2提取步骤1获得的寄生螨膨腹体的基因组总DNA；3以2获得的DNA作为模板，利用四纹豆象和菜豆象的线粒体细胞色素氧化酶b基因Cytb基因序列的特异性引物对进行PCR扩增；4采用2％浓度的琼脂糖凝胶电泳分离扩增产物，根据电泳条带大小判断样品中是否存在四纹豆象或菜豆象，其中四纹豆象所对应的特异性条带为181bp，菜豆象所对应的特异性条带为192bp；所述引物对名称分别为：序列C、序列A，其核苷酸序列分别为SEQIDNO.1-4所示。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 浙江大学 一种用寄生螨间接检测四纹豆象和菜豆象的分子方法

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