申请/专利权人：济南大学

申请日：2023-08-28

公开（公告）日：2023-11-17

公开（公告）号：CN117074498A

主分类号：G01N27/327

分类号：G01N27/327;G01N21/76;G01N33/574;G01N33/532

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2023.12.05#实质审查的生效;2023.11.17#公开

摘要：本发明涉及一种基于Ag2O纳米粒子对多孔C3N5纳米花的猝灭效应的电化学发光传感器的制备方法，属于新型传感器构建技术领域。基于抗原抗体之间良好的特异性，该传感器以多孔C3N5纳米花作为基底发光材料，氨基化的Ag2O纳米粒子为猝灭剂，通过层层组装构建了电化学发光传感器。本发明构建的电化学发光传感器具有较低的激发电位，较宽的检测范围，较低的检测限，较高的灵敏度，对癌胚抗原的检测具有重要的意义。

主权项：1.一种基于Ag2O纳米粒子对多孔C3N5纳米花的猝灭效应用于检测癌胚抗原的电化学发光传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）用Al2O3抛光粉打磨直径为4mm的玻碳电极，超纯水清洗干净，将6µL、0.5~3.2mgmL-1的多孔C3N5纳米花结合癌胚抗原识别抗体的一抗标记物C3N5-Ab1溶液滴加到电极表面，室温下晾干成膜；（2）滴加3µL、质量分数为0.1%的BSA溶液到电极表面，用超纯水洗净，室温下晾干；（3）滴加6µL、0.0005~100ngmL-1的一系列不同浓度的癌胚抗原的抗原到电极表面，孵化2h，超纯水冲洗，室温下晾干；（4）滴加6µL的氨基化的Ag2O纳米粒子结合癌胚抗原识别抗体的二抗标记物Ag2O-NH2-Ab2溶液，超纯水冲洗，室温下晾干，制得一种电化学发光传感器；所述的氨基化的Ag2O纳米粒子结合癌胚抗原识别抗体的二抗标记物Ag2O-NH2-Ab2溶液的制备步骤如下：（1）Ag2O纳米粒子的制备将0.60gAgNO3溶解于50mL去离子水中，并在室温下保持搅拌30min，同时，配制50mL浓度为0.2molL-1的NaOH，将0.2molL-1的NaOH溶液缓慢滴加到已经溶解的AgNO3溶液中，并将该溶液的pH控制在14左右；使用去离子水对所得产物进行离心洗涤4次，并将洗涤后的产物放置在50°C烘箱中干燥12h，对所得样品进行研磨，得到的样品即Ag2O纳米粒子；（2）氨基化的Ag2O纳米粒子的制备取100mg的Ag2O纳米粒子粉末，将其直接置于30mL无水乙醇中搅拌，待Ag2O纳米粒子粉末分散开后加入0.2mL的3-氨丙基三乙氧基硅烷，将油浴锅温度调整到70°C保持冷凝回流1.5h；然后对所得产物进行离心洗涤，先用去离子水洗涤3次再使用无水乙醇洗涤3次，将洗涤后的产物放置到50°C的烘箱中过夜烘干，然后对所得样品进行研磨，得到氨基化的Ag2O纳米粒子即Ag2O-NH2；（3）氨基化的Ag2O纳米粒子结合癌胚抗原识别抗体的二抗标记物Ag2O-NH2-Ab2溶液的制备称取400mmolL-1的（1-（3-二甲氨基丙基））-3-乙基碳二亚胺盐酸盐与100mmolL-1的N-羟基琥珀酰亚胺溶于1mLpH为7.4的磷酸盐缓冲溶液中，待两者溶解完全后向其中加入100μL10μgmL-1癌胚抗原识别抗体Ab2并在4°C下保持2h，随后向其中加入2mg的氨基化的Ag2O纳米粒子粉末，将混合物进行密封并将其保持在4°C下持续震荡孵化过夜，随后加入100μL1%BSA以阻断非特异性位点并离心以除去未结合的抗体，将得到的固体分散在1mLpH7.4的PBS中，即得氨基化的Ag2O纳米粒子结合癌胚抗原识别抗体的二抗标记物Ag2O-NH2-Ab2溶液。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 济南大学 一种基于Ag₂O纳米粒子对多孔C₃N₅纳米花的猝灭效应的电化学发光传感器的制备方法

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