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【发明公布】一种金黄色葡萄球菌噬菌体重组内溶素LysSYL-syn及其制备方法与应用_中国人民解放军陆军军医大学_202311001859.X 

申请/专利权人:中国人民解放军陆军军医大学

申请日:2023-08-10

公开(公告)日:2023-11-17

公开(公告)号:CN117070545A

主分类号:C12N15/70

分类号:C12N15/70;C12N15/56;C12N9/36;A61K38/47;A61P31/04

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2023.12.05#实质审查的生效;2023.11.17#公开

摘要:本发明涉及一种金黄色葡萄球菌噬菌体重组内溶素LysSYL‑syn及其制备方法与应用。通过分析金黄色葡萄球菌噬菌体基因组信息,依据宿主菌的遗传密码使用偏嗜性,将其编码的内溶素基因进行密码子优化,人工设计并合成内溶素编码序列,选择合适的原核表达载体表达噬菌体内溶素LysSYL‑syn;经实验证实,采用本发明所构建的表达载体得到的噬菌体内溶素LysSYL‑syn,体外对金黄色葡萄球菌及某些革兰氏阴性菌表现出显著的杀菌效果,同时具有强大的生物被膜清除能力,体内对金黄色葡萄球菌感染小鼠具有很好的保护作用。上述的金黄色葡萄球菌噬菌体重组内溶素LysSYL‑syn可以用于制备抗细菌生物被膜。

主权项:1.一种金黄色葡萄球菌噬菌体重组内溶素LysSYL-syn,其特征在于,通过如下方法制备而成:1以分离的金黄色葡萄球菌噬菌体SYL编码的内溶素基因lysSYL为模板,依据宿主菌的遗传密码使用偏嗜性,人工设计并合成内溶素编码序列lysSYL-syn;2将合成的lysSYL-syn序列构建于质粒载体上,获得重组质粒;3利用一对引物对所述重组质粒中的目标基因表达框进行扩增,经酶切后插入原核表达载体,转化宿主菌,筛选并获得重组表达质粒pET-lysSYL-syn;4将所述重组表达质粒pET-lysSYL-syn转化宿主菌,筛选重组子进行目标蛋白表达,通过纯化获得重组内溶素LysSYL-syn。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 中国人民解放军陆军军医大学 一种金黄色葡萄球菌噬菌体重组内溶素LysSYL-syn及其制备方法与应用

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