申请/专利权人:德州市荣光生物科技有限公司
申请日:2023-09-21
公开(公告)日:2023-12-15
公开(公告)号:CN117233288A
主分类号:G01N30/02
分类号:G01N30/02;C12N1/14;G01N30/06;G01N30/14;C12R1/645
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.01.02#实质审查的生效;2023.12.15#公开
摘要:本申请涉及白地霉活性检测的技术领域,更具体地说,它涉及一种高效液相色谱测定白地霉活性的方法。一种高效液相色谱测定白地霉活性的方法,包括以下步骤:破碎:取白地霉培养液进行破碎;提取:将破碎白地霉菌培养液降温至3‑5度,随后萃取胺类物质;一次净化:将提取液用离子水溶液进行净化;二次净化:将一次净化提取液在C18的固相萃取柱上净化富集,之后用盐酸溶液冲洗色谱柱,氢氧化钠溶液中和,得到纯净的被测物溶液;加入内标物:将1,7‑庚二胺加入到被测物溶液中;过滤:通过微孔滤膜过滤;检测:对进样溶液进行液相色谱检测,以腐胺、亚精胺及精胺含量定义白地霉活性。本申请的测定白地霉活性的方法具有效率快,准确率高的效果。
主权项:1.一种高效液相色谱测定白地霉活性的方法,其特征在于,包括以下步骤:破碎:取白地霉培养液放入超声波细胞粉碎机中进行破碎,得到破碎白地霉菌培养液;提取:将破碎白地霉菌培养液降温至3-5度,随后萃取破碎白地霉菌培养液中的胺类物质;一次净化:将提取液用离子水溶液进行净化,得到一次净化提取液,离子水溶液包含EDTA、磷酸吡哆醛、二硫苏糖醇及磷酸钠;二次净化:室温下,将一次净化提取液在C18的固相萃取柱上净化富集,之后用盐酸溶液冲洗色谱柱,收集冲洗液加入氢氧化钠溶液中和,得到纯净的被测物溶液;加入内标物:将1,7-庚二胺加入到被测物溶液中;过滤:通过微孔滤膜过滤后,得到进样溶液;检测:对进样溶液进行液相色谱检测,以腐胺、亚精胺及精胺含量定义白地霉活性;高活力:腐胺大于8mgL,亚精胺大于14mgL,精胺大于11mgL;中活力:腐胺4-8mgL,亚精胺8-14mgL,精胺6-11mgL;低活力:腐胺小于4mgL,亚精胺小于8mgL,精胺小于6mgL。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 德州市荣光生物科技有限公司 一种高效液相色谱测定白地霉活性的方法
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