申请/专利权人：华中农业大学

申请日：2021-11-01

公开（公告）日：2023-12-22

公开（公告）号：CN114045254B

主分类号：C12N5/071

分类号：C12N5/071

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.12.22#授权;2022.03.04#实质审查的生效;2022.02.15#公开

摘要：本发明公开了一种Hepa1‑6细胞上清条件培养基促进WBF344细胞向肝细胞分化的方法及应用，属于细胞分化技术领域。本发明中肝细胞分化的方法步骤：1WB‑F344细胞培养；2CMHepa1‑6培养基收集：将Hepa1‑6细胞上清培养基与含有20％FBS的高糖DMEM基础培养基按照1:2混合，获得培Hepa1‑6细胞上清条件培养基；3Hepa1‑6上清培养基刺激WBF344细胞；4对分化培养后获得的分化成熟肝细胞进行检测。本发明的技术方案Hepa1‑6细胞上清培养基能引起WNT通路的激活并促进WBF344细胞向肝细胞分化，分化后的肝细胞成熟指标显著，便于分化培养和推广。

主权项：1.一种Hepa1-6细胞上清条件培养基促进WBF344细胞向肝细胞分化的方法，其特征在于：具体包括以下步骤：（1）WB-F344细胞培养：WB-F344细胞系采用双抗培养基，37℃，5%CO2培养箱培养，待细胞长满至70％~90％时，进行传代培养；（2）Hepa1-6细胞上清条件培养基收集：Hepa1-6细胞系采用双抗培养基，37℃，5%CO2培养箱培养；待细胞长满至70％~90％时，收集Hepa1-6细胞上清培养基，将Hepa1-6细胞上清培养基与含有20％FBS的高糖DMEM基础培养基按照1:2混合，获得培养WBF344细胞用的Hepa1-6细胞上清条件培养基；（3）Hepa1-6细胞上清条件培养基刺激WBF344细胞：WBF344细胞传代培养，采用Hepa1-6细胞上清条件培养基培养5-6天后获得分化成熟肝细胞；（4）对分化培养后获得的分化成熟肝细胞进行检测；所述的双抗培养基，为双抗青链霉素1mL，FBS10mL，高糖DMEM基础培养基89mL。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 华中农业大学 Hepa1-6细胞上清条件培养基促进WBF344细胞向肝细胞分化的方法及应用

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