申请/专利权人：浙江省中医院、浙江中医药大学附属第一医院(浙江省东方医院)

申请日：2023-09-14

公开（公告）日：2024-01-02

公开（公告）号：CN117323415A

主分类号：A61K38/37

分类号：A61K38/37;A61K9/127;A61K47/46;A61P7/04

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.01.19#实质审查的生效;2024.01.02#公开

摘要：本发明公开了一种负载凝血因子VIII脂质体的血小板衍生囊泡及制备方法和应用。所述制备方法步骤如下：血小板囊泡的制备；薄膜分散法制备脂质体包裹凝血因子VIII；将得到的血小板囊泡和凝血因子VIII脂质体经过滤器挤压滤过后，得到负载凝血因子VIII脂质体的血小板衍生囊泡。该负载凝血因子VIII脂质体的血小板衍生囊泡为浓缩药物，增加了载药量；具有缓释作用，延长半衰期和药物作用时间；通过ROS响应药物释放；具有血管靶向作用，靶向出血点，增强修复止血功能；能够降低炎症因子水平，抑制炎症；能够降低药物在储存、运输、使用方面可能带来的降低药物活性的不良作用。

主权项：1.一种负载凝血因子VIII脂质体的血小板衍生囊泡的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：S1.血小板囊泡的制备取全血离心后得到的富血小板血浆，100-120g减速离心5-10min，取上清，再在750-800g减速离心15-20min，弃上清，重悬后用200um滤器滤过三至五遍，100um滤器滤三至五遍，得到血小板囊泡；S2.薄膜分散法制备脂质体包裹凝血因子VIIII.脂质体原料配制每毫升氯仿中加入8-10mg卵磷脂、1.5-2mg胆固醇、2-3mgDSPE-2000、0.8-1mg荧光素和7-7.5mg氢氧化钠，混匀后得到脂质体原料溶液；Ⅱ.薄膜制备将步骤I配制的脂质体原料溶液在真空状态下旋转蒸发三至五分钟，直至出现层状分布的脂质体膜；Ⅲ.脂质体包裹将含凝血因子VIII的溶液与氯仿按照相同的体积混合，将含凝血因子VIII的溶液与步骤Ⅱ制备的脂质体膜混合；IV.超声破碎将步骤Ⅲ得到的混合物进行超声破碎，超声破碎的条件为：功率比：35-40％，开2-3秒，关3-4秒，运行时间8-10分钟；V.透析将超声后的混合物装入含0.9％氯化钠水溶液的透析袋中，透析24-48h，得到凝血因子VIII脂质体；S3.负载凝血因子VIII脂质体的血小板衍生囊泡的制备将步骤S1和S2提取得到的血小板囊泡和凝血因子VIII脂质体溶液混合，100um滤器滤过5-10次，得到负载凝血因子VIII脂质体的血小板衍生囊泡。

全文数据：

权利要求：

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