申请/专利权人：长春师范大学

申请日：2023-10-11

公开（公告）日：2024-01-09

公开（公告）号：CN117363664A

主分类号：C12P7/62

分类号：C12P7/62;C07C67/48;C07C67/56;C07C67/58;C07C69/80;C12N1/14;C12R1/645

优先权：["20230803 CN 2023109705399"]

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.01.26#实质审查的生效;2024.01.09#公开

摘要：本发明公开了一种从牛筋草内生菌Bipolarissp.提取DBP的方法，包括以下步骤：准备沙氏琼脂培养基；制备菌株；菌株的保存；菌株的发酵；菌株的提取与分离；DBP分离：采用高效液相色谱仪，首先采用甲醇：H2O为10％～100％的甲醇溶液进行梯度洗脱；再采用MeOH：H2O为80:20的MeOH溶液在20分钟内等梯度洗脱，得到DBP。

主权项：1.一种从牛筋草内生菌Bipolarissp.提取DBP的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.准备沙氏琼脂培养基；S2.菌株的制备：将牛筋草洗净于室温干燥，叶片表面用75％乙醇喷洒消毒30s后，无菌水冲洗3-5次，剪成小块，研碎，加入5mL无菌水，继续研磨；使用移液枪吸取研钵中混匀的液体100μL至沙氏琼脂培养基平板上，涂布均匀；将涂布均匀的平板放于超净台上，翻转平板，28℃下培养5d，观察到菌落在平板上形成后，挑取单菌落至新的培养基上，28℃恒温培养3d；重复操作，直至观察到单个菌落状态；S3.菌株的保存：将纯化好的菌种转移到甘油管中，编号并低温保存；S4.菌株的发酵：将平板切成小块，接种于30L蒸压灭菌液体培养基PDB，25℃静态培养30天；S5.菌株的提取与分离：发酵结束后，菌液加入乙酸乙酯萃取，共3次，菌丝体利用乙酸乙酯进行提取，合并萃取液，减压回收溶剂乙酸乙酯得浸膏；S6.DBP分离：采用高效液相色谱仪，首先采用甲醇：H2O为10％～100％的甲醇溶液进行梯度洗脱；再采用MeOH：H2O为80:20的MeOH溶液在20分钟内等梯度洗脱，得到DBP。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 长春师范大学 一种从牛筋草内生菌Bipolaris sp.提取邻苯二甲酸二丁酯的方法

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