申请/专利权人：福建亿彤生物科技有限公司

申请日：2023-10-25

公开（公告）日：2024-01-12

公开（公告）号：CN117384861A

主分类号：C12N5/20

分类号：C12N5/20;C07K16/40;C12N15/13;C12N15/85;C12N15/64;C12N15/62;C12N9/24;G01N33/577;G01N33/573;G01N33/574

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.01.30#实质审查的生效;2024.01.12#公开

摘要：本发明涉及单克隆抗体和识别CHI3L1蛋白的方法。具体地，涉及构建能够表达特异性抗CHI3L1杂交瘤细胞的方法，包括步骤：制备重组人源壳多糖酶3样蛋白1；将重组抗原分批多次免疫小鼠后，取免疫效果良好的小鼠的脾脏细胞；将脾细胞与瘤细胞进行融合，并在HAT培养基进行筛选，进一步通过ELISA筛选高效价阳性细胞，得到能够表达特异性抗CHI3L1的杂交瘤细胞。还涉及制备单克隆抗体Anti‑hCHI3L1‑MM08的方法，该单克隆抗体、重组载体、表达该单克隆抗体的重组细胞，重组细胞的构建方法，以及它们用于制备检测CHI3L1试剂的用途。本发明单克隆抗体具有优良性能。

主权项：1.构建杂交瘤细胞的方法，包括如下步骤：i制备重组人源壳多糖酶3样蛋白1：构建包含人CHI3L1基因序列的真核表达载体，并将所述的真核表达载体转至DH5α感受态挑取单克隆并提取质粒，将质粒以PEI包裹并转入HEK-293F细胞中进行表达，在表达6天后，将细胞上清进行离心收集，纯化得到重组抗原即重组人源壳多糖酶3样蛋白1；该制备重组人源壳多糖酶3样蛋白1的方法进一步如说明书所述；ii将所述的重组抗原分批多次免疫小鼠后，取免疫效果良好的小鼠的脾脏细胞；iii将脾细胞与瘤细胞进行融合，并在HAT培养基进行筛选，进一步通过ELISA筛选高效价阳性细胞，得到能够表达特异性抗CHI3L1的杂交瘤细胞。

全文数据：

权利要求：

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