申请/专利权人：安徽农业大学

申请日：2023-10-24

公开（公告）日：2024-01-16

公开（公告）号：CN117397516A

主分类号：A01G17/00

分类号：A01G17/00;A01G7/06;G01N21/78;G01N21/31

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.02.02#实质审查的生效;2024.01.16#公开

摘要：本发明公开了一种提高人工栽培青钱柳叶中次生代谢物含量的方法，包括以下步骤：S1、天然菌根真菌接种剂的获得：S11、在野外找到呈集群分布的青钱柳居群，选取树龄60年以上且生长良好的大树；S12、挖取浅层（0~30cm）细根，用消毒的剪刀剪取细根，连同细根表面的根际土壤一起带回实验室。该一种提高人工栽培青钱柳叶中次生代谢物含量的方法通过挖取浅层（0~30cm）细根，将细根剪为约1cm长的根段，与根际土壤混合均匀作为混合天然菌根真菌接种菌剂，使用青钱柳天然菌根真菌接种菌剂的制备和接种方法简单易行，成本低，可协同提高青钱柳的生长和次生代谢，克服了传统栽培中要提高次生代谢含量必须限制生长的弊端。

主权项：1.一种提高人工栽培青钱柳叶中次生代谢物含量的方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：S1、天然菌根真菌接种剂的获得：S11、在野外找到呈集群分布的青钱柳居群，选取树龄60年以上且生长良好的大树；S12、挖取浅层（0~30cm）细根，用消毒的剪刀剪取细根，连同细根表面的根际土壤一起带回实验室；S13、将细根剪为约1cm长的根段，与根际土壤混合均匀作为混合天然菌根真菌接种菌剂；S14、将天然菌根真菌接种菌剂在通风和无污染的地方自然风干，风干后的菌根真菌接种菌剂放置于-20℃的冰柜中保存；S2、接种方法：S21、于5月底至6月初对人工栽培的青钱柳植株进行接种；S22、沿树干挖直径30~50cm的圆形接种坑，深度以露出根系为准；S23、然后将上述风干的菌根真菌接种菌剂均匀撒播与根系周边，每棵植株约100g接种剂，使苗根与菌剂充分接触；S24、然后用土掩埋轻轻压实即可，接种一个月以后即可达到明显促进生长和次生代谢的作用；S3、黄酮类化合物含量测定：S31按常规方法于5月中旬开始对各试验单元中所有青钱柳植株的苗高和地径生长进行测定,最后计算各试验单元的平均树高和地径生长状况，以后每月中旬进行重复调查,直至生长基本停止的11月中旬；S32、每月测定生长指标后,按照混合采样法从试验单元中的青钱柳植株中上部采集完全功能叶；6月中旬第1次采集,直至11月,共进行6次采样；采集的样品经去叶柄、烘干、磨碎后密封后保存在0~4℃冷库；S33、每个植物样品称取约2g左右,用滤纸包好后放入250mL索氏提取器并用石油醚在80℃水浴锅中回流提取4h，以去除叶样品中极性较小的脂溶性成分，丢弃提取液将药渣在室温下自然晾干,挥干后的药渣作为黄酮和三菇提取的样品，本试验采用超声波辅助提取法，用75%乙醇水溶液在65℃条件下超声提取45min,在同样条件下提取2次；S34、总黄酮的测定参照Bao等所描述的优化后的比色法进行测定，精密吸取1mL提取液置于10mL容量瓶，加入0.3mL5%NaNO溶液，在室温下放置5min后加入0.3mL1%的AICI-甲醇溶液，而后加入1MNaOH溶液混匀并在室温下显色15min，最后在410nm处测定吸光度。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 安徽农业大学 一种提高人工栽培青钱柳叶中次生代谢物含量的方法

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