申请/专利权人：江苏省农业科学院

申请日：2020-12-30

公开（公告）日：2024-01-19

公开（公告）号：CN112602589B

主分类号：A01H1/02

分类号：A01H1/02;A01H1/04;C12Q1/6895;C12Q1/6858

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.01.19#授权;2021.04.23#实质审查的生效;2021.04.06#公开

摘要：本发明属于水稻遗传育种技术领域，公开了一种快速精准选育半糯型粳稻恢复系的方法，选用含有半糯基因wxmq但不含雄性不育育性恢复基因Rfla的半糯型常规粳稻南粳9108为供体亲本，含Rfla基因的非半糯粳型恢复系宁恢821为受体亲本，通过回交、自交，同时利用分子标记进行辅助选择，将半糯基因和雄性不育育性恢复基因聚合到同一个品种中获得半糯型粳稻恢复系。本发明通过特定分子标记快速检测方法筛选，采用快速精准高效转育和分子辅助选择来提高育种效率，在粳稻恢复系中实现半糯基因、恢复系基因的有效聚合，加快了育种进程的同时加速了半糯型杂交粳稻在生产中的快速应用。

主权项：1.一种杂交粳稻快速精准选育方法，其特征在于，所述杂交粳稻快速精准选育方法采用半糯型粳稻恢复系；所述快速精准选育半糯型粳稻恢复系的方法包括：步骤一，选择含有胚乳低直链淀粉含量纯合基因型wxmqwxmq常规粳稻品种南粳9108为父本与含有雄性不育育性恢复纯合基因型RflaRfla的粳型恢复系宁恢821作为母本进行杂交获得F1；步骤二，以南粳9108为轮回亲本母本，F1代植株为父本进行一次回交，获得BC19108F1杂种，对BC19108F1植株进行半糯基因和恢复基因的分子标记检测，选择BC19108F1中同时含有半糯基因Wxmq和雄性不育育性恢复基因Rfla两种基因的植株做父本，以宁恢821为轮回亲本母本进行二次回交，获得BC2821F1；步骤三，将BC2821F1植株自交加代形成BC2F2群体，对群体中的单株进行分子标记检测，选择含有Wxmq和Rfla两种基因型特征的单株继续自交，获得BC2F3株系；步骤四，种植BC2F3株系，利用半糯基因和恢复基因分子标记对各株系进行检测，选择株系内所有单株都含有Wxmq和Rfla两种纯合基因型特征的株系进行区收，获得基因型为wxmqwxmqRflaRfla半糯型粳稻恢复系材料；所述对BC19108F1植株进行半糯基因和恢复基因的分子标记检测包括：1采用SDS法进行水稻植株基因组DNA的提取；2利用四引物PCR分子标记对提取的DNA进行半糯基因Wxmq的分子检测，所述PCR分子标记四引物序列如下所示：正向外引物Wx-mq-O-F序列为：5'-ATGTTGTGTTCTTGTGTTCTTTGCAGGC-3'反向外引物Wx-mq-O-R序列为：5'-GTAGATCTTCTCACCGGTCTTTCCCCAA-3'正向内引物Wx-mq-I-F序列为：5'-GGGTGAGGTTTTTCCATTGCTACAATCG-3'反向内引物Wx-mq-I-R序列为：5'-GTCGATGAACACACGGTCGACTCAAT-3'；3利用InDel标记引物InDel-Rfla对提取的DNA进行粳稻雄性不育恢复基因Rfla的分子检测；步骤1中，所述采用SDS法进行水稻植株基因组DNA的提取包括：1.1取水稻苗期叶片，在-20℃预冷的研钵中用液氮研磨并装入1.5mL离心管；加入600uL提取液，摇匀，65℃温浴30min，中间振荡3～4次；1.2加入14体积5MKAC，摇匀后置冰上30min；加入由氯仿、异戊醇按24:1的比例配置的混合液300～400uL，在摇床上充分振荡，120rpm，30min；1.38，000～10，000rpm离心15分钟，液面分层，下层颜色较深，上层微带黄绿色，取上清至另一离心管；加入等体积氯仿、异戊醇，摇床上充分振荡，80～90rpm，30min；1.48，000rpm离心15分钟，转移上清至新的离心管；加入2倍体积-20℃预冷的无水乙醇，轻轻摇匀直到有絮状物产生，12，000rpm离心6min；1.5弃无水乙醇，加入4℃70％乙醇，放置10min，弃上清，超净工作台上风干1h；加入100～200uLTE，-20℃保存；步骤1.1中，所述提取液由20％SDS，1MTris-HCl，0.5MEDTA，5MNaCl，65℃预热得到。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 江苏省农业科学院 一种快速精准选育半糯型粳稻恢复系的方法

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