申请/专利权人：中国农业科学院生物技术研究所

申请日：2022-10-27

公开（公告）日：2024-01-26

公开（公告）号：CN116047047B

主分类号：C07K16/00

分类号：C07K16/00

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.01.26#授权;2023.08.04#实质审查的生效;2023.05.02#公开

摘要：一种定量检测转基因玉米中抗虫蛋白Cry1F的酶联免疫试剂盒及其检测方法，所述酶联免疫试剂盒由包被捕获抗体的微孔反应板、样品处理液、生物素标记的检测抗体、标准品、辣根过氧化物酶标记的亲和素、生物素标记的抗体稀释液、辣根过氧化物酶标记的亲和素稀释液、浓缩洗涤液、底物溶液、终止液和板贴组成，从而具有操作简便、能同时快速检测大批样品，具有高灵敏度、高特异性的特点。

主权项：1.一种定量检测转基因玉米中抗虫蛋白Cry1F的酶联免疫试剂盒，其特征在于，所述酶联免疫试剂盒由包被捕获抗体的微孔反应板、样品处理液、生物素标记的检测抗体、标准品、辣根过氧化物酶标记的亲和素、生物素标记的抗体稀释液、辣根过氧化物酶标记的亲和素稀释液、浓缩洗涤液、底物溶液、终止液和板贴组成；其中，样品处理液为：1MTris,pH7.5500uL，1MNaCL1.5mL，0.5MEDTA20uL，50%甘油2mL，10%SDS1mL，用双蒸水配成10ML，使用时添加1片蛋白酶抑制剂以及50uL的1mM苯甲基磺酰氟；生物素标记的检测抗体：100μgmL生物素标记的Cry1F1F71D8鼠单抗，鼠单抗溶液即PBS,50%甘油溶液；标准品：2.5ng的His-Cry1F重组蛋白；辣根过氧化物酶标记的亲和素为1:40辣根过氧化物酶标记的亲和素溶液；生物素标记的抗体稀释液以及辣根过氧化物酶标记的亲和素稀释液配方为1%BSA1g，0.05%的吐温200.05mL，0.1%的NaN30.1mL，最终用1×PBS定容至100mL；浓缩洗涤液：含有1.0%Tween-20的10×PBS；底物溶液：0.5mL2mgmLTMB无水乙醇溶液，10mL底物缓冲液，32μL30%H2O2混合，现用现配；终止液：1MH2SO4，所述的捕获抗体由保藏号为CGMCCNo.45008的杂交瘤细胞株1D71C6分泌得到的，捕获抗体的检测范围0.3125ngmL-2.5ngmL；所述检测抗体由保藏号为CGMCCNo.45009的杂交瘤细胞株1F71D8分泌得到。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国农业科学院生物技术研究所 抗虫蛋白Cry 1F酶联免疫定量检测试剂盒及方法

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