申请/专利权人：中国科学院深海科学与工程研究所

申请日：2023-11-01

公开（公告）日：2024-01-26

公开（公告）号：CN117143808B

主分类号：C12N5/071

分类号：C12N5/071

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.01.26#授权;2023.12.19#实质审查的生效;2023.12.01#公开

摘要：本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种稳定获得鱼鳍上皮样细胞的培养方法。本发明提供了组合物、培养基及细胞的培养方法，通过在培养基中添加一定浓度的Y‑27632、A83‑01和CHIR99021，促进鱼鳍中类上皮细胞的生长，抑制其凋亡，从而可以稳定地获得鱼鳍类上皮样细胞系，提高鱼类鱼鳍来源的上皮样细胞系的构建效率。

主权项：1.鱼鳍上皮样细胞的培养方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤（1）：采集鱼鳍组织，清洁灭菌，剪碎，获得碎组织；步骤（2）：取步骤（1）所述碎组织接入含有Y-27632、A83-01、CHIR99021、FBS和抗生素的L-15培养基，培养4～6天，更新培养基，使所述Y-27632、所述A83-01和所述CHIR99021的浓度分别下降一半，培养至第12天时，更新培养基，使所述Y-27632、所述A83-01和所述CHIR99021含量皆为零，培养，传代；所述Y-27632、所述A83-01和所述CHIR99021的摩尔比为10:4:1；所述鱼鳍包括鱼尾鳍、背鳍或胸鳍中的一种或多种；所述FBS在所述L-15培养基中的含量为20%；所述抗生素包括100UmL青霉素、0.1mgmL链霉素和0.50mgmL庆大霉素的混合溶液。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国科学院深海科学与工程研究所 一种稳定获得鱼鳍上皮样细胞的培养方法

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