申请/专利权人：中国科学院沈阳应用生态研究所

申请日：2020-04-30

公开（公告）日：2024-01-30

公开（公告）号：CN113583887B

主分类号：C12N1/20

分类号：C12N1/20

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.01.30#授权;2021.11.19#实质审查的生效;2021.11.02#公开

摘要：本发明涉及农药降解技术，具体的说是一种降解农药2,4‑D的厌氧菌群的富集培养方法。富集培养体系的建立方法如下：在使用混气板向培养基体系顶空不断通入N2的条件下，向厌氧培养基无机盐中添加SeW混合盐和微量元素，在35‑45℃加入还原剂，而后添加pH缓冲盐，再利用混气板向体系内通入N2CO2的混合气，使培养基体系pH为7.2‑7.5，灭菌后加入维生素和电子供体。其中，还原剂为L‑半胱氨酸、Na2S·9H2O和DL‑二硫苏糖醇。本发明富集培养体系中不含硫酸盐成分，并且含特定的还原剂，利用该体系在厌氧条件下将2,4‑D彻底转化为甲烷和二氧化碳，不但解决其降解不彻底引起的环境问题，也能为深层土壤、地下水、河流和湖泊底泥等厌氧环境中的2,4‑D农药污染修复提供重要的微生物修复材料。

主权项：1.一种制备富集培养降解农药2,4-D的厌氧菌群的富集培养体系的方法，其特征在于：富集培养体系为利用混气板向培养基体系通N2，并向厌氧富集培养基无机盐中添加SeW混合盐和微量元素，在35-45℃加入还原剂，而后添加pH缓冲盐，再利用混气板向体系内通入N2CO2的混合气，使培养基体系pH为7.2-7.5，灭菌后加入维生素和电子供体；其中，还原剂为L-半胱氨酸、Na2S·9H2O和DL-二硫苏糖醇；所述培养基灭菌后加入碳源；所述还原剂各成分于厌氧富集培养基中的终浓度分别为L-半胱氨酸0.03-0.04gL、Na2S·9H2O0.04-0.05gL和DL-二硫苏糖醇0.1-0.2gL；所述碳源于厌氧富集培养基的终浓度为4.0-6.0mmolL，其中，碳源为乳酸和或乙酸；所述电子供体为纯氢气，添加量为5-10mL每60mL顶空；所述SeW混合盐各成分于厌氧富集培养基中的终浓度分别为5.0-7.0mgLNa2SeO3·5H2O、7.0-9.0mgLNa2WO4·2H2O和0.4-0.6gLNaOH；所述微量元素各成分于厌氧富集培养基中的终浓度分别为FeCl2·4H2O1.0-2.0gL、CoCl2·6H2O0.1-0.2gL、MnCl2·4H2O0.05-0.2gL、ZnCl260-80mgL、H3BO35.0-7.0mgL、Na2MoO4·2H2O30-40mgL、NiCl2·6H2O20-30mgL、CuCl2·2H2O1.0-3.0mgL；所述无机盐各成分于厌氧富集培养基中的终浓度分别为NaCl1.0gL、MgCl2·6H2O0.5gL、KH2PO40.2gL、NH4Cl0.3gL、KCl0.3gL、CaCl2·2H2O0.015gL，氧气指示剂刃天青在培养基中终浓度为0.001‰质量比；所述pH缓冲盐为NaHCO3，其在培养基中终浓度为2.0-3.0gL。

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百度查询： 中国科学院沈阳应用生态研究所 一种降解农药2,4-D的厌氧菌群的富集培养方法

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