申请/专利权人：江苏金迪克生物技术股份有限公司

申请日：2023-10-16

公开（公告）日：2024-02-06

公开（公告）号：CN117512031A

主分类号：C12P19/04

分类号：C12P19/04;C08B37/00;C12R1/46

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.02.27#实质审查的生效;2024.02.06#公开

摘要：本发明属于生物医药领域，涉及一种细菌荚膜多糖的纯化方法，具体来说，特别涉及肺炎球菌荚膜多糖的纯化方法。本发明公开了一种纯化肺炎球菌荚膜多糖的工艺。步骤包括：肺炎球菌经无动物源成分的培养基发酵培养、溶解灭活、澄清、超滤浓缩等步骤得到肺炎球菌多糖粗提溶液，通过组合酸化和层析工艺，去除不同血清型的肺炎球菌荚膜多糖纯化过程中的杂质，得到符合要求的肺炎球菌荚膜多糖。本发明在不使用有毒有害物质苯酚、易燃易爆物质乙醇、导致工艺繁琐的物质CTAB的情况下和外源酶蛋白酶、核酸酶等物料的添加的条件下，有效去除杂质并获得符合药典标准要求的细菌荚膜多糖产品。

主权项：1.一种肺炎球菌荚膜多糖的纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：1在装有不含动物源性成分的培养基的发酵罐中培养肺炎球菌；2将发酵培养获得的肺炎球菌发酵液加入终浓度0.05-0.5％的脱氧胆酸钠于4-30℃灭活0.25-24h，得到细菌溶解液；3使用连续流碟片式离心机以不低于10000G相对离心力离心步骤2裂解后的细菌发酵液，再微滤去除沉淀物后得到发酵澄清液；4对步骤3获得的发酵澄清液进行超滤浓缩并换液，获得去除大部分可溶性蛋白质、核酸和大颗粒杂质的荚膜多糖溶液；5在步骤4获得的荚膜多糖溶液加酸调节pH值，静置0.5-4h后，在20℃下以不低于10000G相对离心力离心1h，弃去存在在于沉淀中的蛋白质和核酸等杂质，收集含有荚膜多糖成分的上清液；6配制平衡缓冲液与梯度洗脱液，使用平衡缓冲液平衡层析柱至基线稳定；将步骤5中获得的上清液进行色谱层析，检测206nm紫外吸收峰，收集流穿峰，收获后使用梯度洗脱液洗脱，收获洗脱峰，合并后获得纯化的荚膜多糖溶液；7将步骤6获得的荚膜多糖溶液进行超滤浓缩和洗滤，并进行无菌过滤、保存。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 江苏金迪克生物技术股份有限公司 一种肺炎球菌荚膜多糖的纯化方法

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